La recombinase Cre

[invite648f4baa]

Es-ce que quelqu’un à déjà entendue parlé d’utiliser la recombinase Cre directement dans le milieu de culture de cellules souche ES pour induire une recombinaison ? ça serait un bon moyen d’avoir un système inductible.
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[invited8287251]

En fai tu introduis deux sites lox dans le gene que tu veux muter par recombinaison homolgue dans les cellules ES ("floxer le gene"). Une fois que tu as les souris transgeniques tu les croises avec des souris qui expriment la Cre (de maniere tissu-spécifique par ex, il existe pas mal de souches disponibles). Tu peux egalement utiliser une cre modifiée, qui est fusionnée au domaine de laiaison du recepteur aux oestrogenes (qui possede une mutation le rendant isensible aux oestrogenes endogènes). Elle n'est active que si on traite les souris par un agoniste des oestrogenes ce qui permet de controller dans le temps l'expression de la Cre.