TON de Horseradish peroxidase

[invite947abf84]

Forumeuses, Forumeurs,

J'aurai une petite question toute bête (j'imagine), mais un vieux sage m'a dit qu'il n'y avait pas de questions bêtes, seules les réponses le sont parfois...alors je me lance.

Est il possible de connaitre exactement le TON (turn over number) de HRP ou bien est ce très très variable en fonction des conditions expérimentales. Et si oui, quel est ce TON dans des conditions optimales ??
En fait je cherche a avoir une idée la plus précise possible du nombre de photons auquel je dois m'attendre lors l'activation de HRP avec des réactifs commerciaux du genre Amersham ECL ou Pierce superSignal.

J'éspère que cette question est assez précise et que je n'oublie pas certains paramètre important dans mon raisonnement....

En tout cas merci d'avance pour votre réponse !!

Polyclonal
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[invite947abf84]

Oops,

Il semble que ma question n'interesse personne ou bien qu'elle présente un difficulté pour les spécialistes ??...
des réactions ?

Merci...
Polyclonal

[Jean-Luc P]

Bonjour, a priori si tu regarde par bioluminescence ça va dépendre de la stabilité du produit, et de son ratio d'émission. Je ne suis pas sûr que Pierce et Amersham divulgent la nature exacte de leurs produits.

Dans les conditions optimales tu peux trouver les caractéristiques de l'enzyme, qui permettent de déduire la quantité de produit formé avec ta concentration de substrat. La HRP est assez robuste il me semble, je pense qu'elle n'est aps hyper sensible aux conditions expérimentales, en tampon TRIS ph 8.5 ça doit être proche de l'optimal.

[invite947abf84]

Bien reçu.

Merci

[A voir en vidéo sur Futura]