cytométrie de flux
bonjour,
j'ai une question concernant la cytométrie de flux, et je cherche quelqu'un qui pourrait m'orienter. je voudrais en fait savoir si le cytomètre de flux peut détecter les cellules mortes, et si on utilise bien cette technique pour réaliser la NFS "numération formule sanguine".
merci d'avance.
Salut,
Si mes souvenirs sont bons, on utilise bien la cytométrie pour caractériser les cellules en train de mourir. En général, on distingue les cellules en apoptose de celle en nécrose (deux types de morts cellulaires différents). Pour l'apoptose, on fait des marquages à l'annexin V (se fixe sur des phosphatidylsérine de la membrane plasmique). En général, on considère que c'est une étape précoce de l'apoptose. Cependant je ne suis pas sur à 100% que ça ne marque pas les cellules en nécrose. On utilise également l'iodure de propidium (marqueur de l'ADN) pour les cellules en apoptose, il faut utiliser un détergent pour permettre à l'iodure de propidium de rentrer alors que pour les cellules en nécrose ça rentre tout seul (ce qui permet de les différencier). Pour les cellules en apoptose, il y a une étape de découpage de l'adn (peut etre pas pour l'apoptose caspase indépendante? car il y a des sous vtype dans l'apoptose pour l'autophagie, je sais plus si on passe par des caspases) ce qui fait que le marquage à l'iodure de propidium est moins fort que pour des cellules en G0G1 (on parle de pré G1). Je suppose donc qu'avec ces méthodes, on doit pouvoir (théoriquement) caractériser des cellules en train de mourir dans le sang. Mais bon, c'est toujours mieux d'avoir une deuxième méthode en parrallèle (western par exemple)
Bonjour,
On peut détecter les cellules mortes en cytométrie (comme le souligne bien Léo2). Il existe de nombreuses possibilités.
Par contre on n'utilise pas la cytométrie pour faire des NFS mais des conteurs de cellules type Coulter. En fait, la cytométrie est un mauvais moyen pour compter des cellules en général.
Cordialement
Je te remercie pour toutes ces précisions
Re : cytométrie de flux
un grand merci a tous
