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Calcul d'unités enzymatiques



  1. #1
    samanthaa

    Calcul d'unités enzymatiques

    hello,

    J'ai un énorme problème pour un TP...

    Je dois calculer la quantité théorique d'enzyme de restriction Bam HI et Hind III a utiliser pour digérer 1 microgramme de plasmide pSK et 1microgramme de plasmide pCR-gai ds les conditions standards.

    On nous donne

    Nbr de sites de restriction par molécule :

    _________pSK (2.9 kpb)--pCR-gai (5.5kpb)--- phage lambda ( 50 kpb )
    Hind III ---------1site ---------- 2sites -------- 6sites
    BamHI ---------1-------------- 2 ---------------5

    Je connais la définition d une unité d'enzyme de restriction mais je ne comprends pas comment interpréter 1microgramme d'ADN du phage lambda alors qu'on nous donne 50kpb... Y a t il une conversion a faire???

    Merci d 'avance

    -----


  2. #2
    manel_d29

    Re : calcul d'unité d'enzyme

    Salut
    t'as 50kB pour le phage et 2,9kb pour le psk. d'un autre coté t'as un site de restriction HindIII pour 6 dans le phage:
    pour caculer la untité d'enzyme:
    (50/2,9)*(1/6) et tu obtiens 2,8 unités d'enzymes

    même chose pour Bam H1:
    (50/2,9)*(1/5) et tu obtiens 3,44 unités pour 1µg

    et tu continues pour les autres
    je crois que c ça.
    Bon courage

  3. #3
    qqundejm

    Re : calcul d'unité d'enzyme

    Bonjour, ce fil m'intéresse car c'est a mon tour de faire ce TP ^^
    Je ne comprend pas du tout ce calcul. Pourriez vous l'expliquer un petit peu car je nage complètement.
    50/2.9 ca j'ai compris, c'est pour se situer sur une même distance en paire de bases. Mais pourquoi multiplie cela par 1/6...
    Merci

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