URGENT Préparations PBS, la vraie?

[aliband]

Bonjour,

voilà j'utilise souvent du PBS pour les manips d'immunohisto.
Cependant j'ai remarqué des usages et des préparations totalement différents suivant les habitudes des gens et traditions de la discipline.
Voilà je vous donne ci-dessous deux manières fréquentes de préparer du PBS.

Préparation 1:
1x Phosphate Buffered Saline—PBS:
NaCl 137 mM
KCl 2.7mM
Na2HPO4 8 mM
KH2PO4 2 mM
compléter à 1l et ajustez pH=7.4

Préparation 2:
faire solution A Na2HPO4 100mM
faire solution B NaH2PO4 100mM
puis: 405 ml de A + 95 ml de B + 9g NaCl et compléter à 1l ajuster pH=7.4


Vous voyez que la concentration en Phosphate est vraiment très éloignée entre les 2 méthodes pour par exemple un soi-disant PBS 0,1M.
Le problème vient peut-être aussi du fait que deux annotations différentes sont souvent associées pour indiquer la concentration du PBS: on trouve PBS 0,1M ou PBS 0,1X

LAQUELLE UTILISEZ-VOUS?
SAVEZ-VOUS LAQUELLE CORRESPOND REELLEMENT A DU PBS ?

merci
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[aliband]

Merci de vos réponses

[Lord M]

Salut !

J'utilise du PBS pour faire de la protéomique. Je le prépare selon la méthode numéro 2, mais sans ajouter de NaCl, juste en mélangeant les 2 solutions j'usqu'à obtenir le pH voulu.

[Cococcinelle]

Bonjour,

j'ai aussi differentes recettes de PBS suivant les manips que je fait et je me demande aussi pourquoi: Mais mes recettes se rapprochent de ta soltion n°1.
En tout cas, pour parler de concentration, on parle de PBS 1x, 0.1X etc et generalement pas en molair (M) parce que M correspond a une entite ( 0.1M de NaCl par exemple). Mais comme c'est un melange, on parle de 1x concentre (correspondant a tant et tant de M de chaque composant) et on dilue ou concentre (1x, 5x, 0.1x...).

[A voir en vidéo sur Futura]

[pticoeur]

salut,

Pour plus de simplicité on peut en acheter du tout fait. nous on achete du PBS 10X et on le dilue pour en avoir du 1X