pb clonage moléculaire

[invite045165de]

les conditions optimales de clonage?
comment augmenter le rendement de clonage?
à quoi peut servir le clone recombinant?
quelles sont les manipulations à effectuer pour caracteriser ce clone?
comment discuter l'efficacite de clonage?
Merci
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[invitec9f0f895]

salut

ca c'est de l'expeditif!!!!
tu n'as pas meme pas eut le temps de nous introduire tes questions ? voir meme faire des phrases!?...en plus tu ne nous donnes meme pas ton niveau

J'espere que tu ne crois quand meme pas qu'on va te macher tout le travail!
donnes nous tes reponses au moins qu'on vois ou il faut t'aider.

Yoyo

[invitee863e61a]

Je suggère la prochaine fois, d'enlever les points d'interrogations inutiles..ou que l'on adopte le Novlangue une fois pour toute

[invite045165de]

Je suis un étudiant de 2eme année biotechnologie
J’ai trouvé des difficiles a résoudre le problème de clonage moléculariste
J’ai un expose à présenté ce jeudi c’est pourquoi j’ai besoin de réponses à ces questions le plus tôt possible
Merci d’avance

[A voir en vidéo sur Futura]

[invitec9f0f895]

bon en passant sur la langue qui n'a pas l'air d'etre ta langue maternelle, tu en penses quoi de ces questions?

Yoyo

[invite186e1b0b]

Salut!
Clairement,ca envoie sec par ici !


"les conditions optimales de clonage? "
"comment augmenter le rendement de clonage?"
"à quoi peut servir le clone recombinant?"
"quelles sont les manipulations à effectuer pour caracteriser ce clone?"
"comment discuter l'efficacite de clonage?"

Question que qui me vient direct à l'esprit : C'est quoi tes clones?(des bactéries? des orcs? (voir le seigneur des anneaux)?

Bon je donne une piste pour la dernière parce c'est la plus interressante:
Je vais juste dire 3-4 mots "marqueurs spécifiques, survie, rendm..." après c'est toi qui voit...

amicalement,

Greg

[invite045165de]

J’ai trouve la réponse à propos du clonage
Conditions optimales du clonage
• L’enzyme de restriction doit être de bonne qualité
• L’enzyme de restriction coupe dans des endroits spécifiques
• La température de la ligation des extrémités cohésives est donc une
température de compromis qui tient compte de la vitesse de la réaction
enzymatique et de l’association des extrémités: elle se situe entre 4 et 15°C
• La production de recombinants est augmentée si la réaction s’effectue à une concentration élevée d’ADN
• Traitement de l’ADN linéarisé du plasmide vecteur avec la phosphatase alcaline qui enlève les groupes 5’ phosphate terminaux évité la recirculation du vecteur et la formation de dimères de plasmide. Après ce traitement, on puisse donc ajouté l’insert
• Une masse moléculaire peu élevée des plasmides car, ils sont faciles à manipuler, ils sont présents en beaucoup d’exemplaire ce qui facilite leurs isolement, mais surtout amplifier l’expression de tout les gène qui y sont clonés. En plus leur taille augmente la probabilité d’y trouver des sites de restriction unique
• Un site unique pour une série d’endonucléases de restriction, localisé de préférence dans des gènes dont l’expression phénotypique est facilement
détectable ( Lac Z)
• Les cellules de Ecoli et l’ADN plasmidique interagissent de façon productive en présence d’ions calcium et à base Température (o-5°C)