gènes de ménage et PCR quantitative... ?

[invite4944608c]

bonjour à tous,

je fais des qPCR depuis peu. jusqu'à maintenant, j'ai utilisé la G3PDH comme gène de ménage pour normaliser les variations d'expression des gènes que j'étudie.

le problème est que j'ai observé des variations d'expression de la G3 suite au traitement que j'utilise sur mes cellules.

j'aimerais tester d'autres gènes de ménages. si vous aviez quelques suggestions je vous serais reconnaissante. (sachant que j'étudie une réponse proliférative, j'ai du mal à savoir quel gène pourrait ne pas bouger !)
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[invite02cefc91]

Bnojour


Moi je vais m'y mettre à la QPCR et j'ai fait un peu le tour des gènes de référence qu'on utilise pour mon matérile et on retrouve :

- l'actine
- L'ubiquitine
- La cyclophilin
- La tubuline
- RNA 18S

Voila

[invite689529bc]

Bonjour,

Pour ma part j'utilise la GAPDH et HPRT, l'un de ces deux gènes de ménage.

Bon courage,
Belouga7

[invite4944608c]

Salut, merci pour vos réponses.
Je me demandais surtout quel serait le gène le plus approprié pour être utilisé Dans des conditions de variation de la prolifération.
Dans ces conditions la G3 bouge.
L'actine et la tubuline, il y a des chances que ça bouge aussi.
Je ne savais pas qu'on pouvait utiliser l'ubiquitine. Son expression transcriptionnelle ne varie-t-elle pas au cours du cycle ?

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite02cefc91]

Oui après c'est sur tout dépend de l'organisme étudié.

Je sens qu'une petite recherche biblio sur toi s'impose pour voir ce que les autres équipes ont utilisé dans leur article