Bonsoir à tous!!!
je fais des extraction d'ADN à partir de sang humain atteint par le VIH,j'ai pas réussi a avoir un protocole convenable surtout pour la lyse des globules blancs.j'aimerais bien avoir une technique convenable et surtout fiable parce que mes ADN sont fragmentés et de mauvaise qualité(avec le détail des quantités de chaque réactif dans chaque solution ou bien simplement avoir la gentillesse de m'envoyer des sites ou des liens qui peuvent m'aider)merci infiniment!
Bonjour,
Ce n'est pas la peine d'ouvrir 30000 discussions identiques...
Peux-tu préciser avec quoi tu travailles pour les extractions? Et à quoi tu veux parvenir?
Cordialement,
je suis nouvelle sur le site et c ma première visite!!je vais finir par m'y habituer et désormais vous n'aurez pas 3000 discussions!!!
sinon je commence normalement par la lyse des globules rouges plusieurs lavages( solution:Tris,MgCl2,NaCl)et puis celle des blancs par (Tris HCl,EDTA,Nacl, et SDS..proteinase K...aprés éthanol absolu ...
NB:je ne fais pas d'extraction par le chloroforme,enfin on l'utilise pas dans mon laboratoire.
cordialement
Envoyé par crazycool
Ce n'est pas seulement pour "nous", mais pour toi aussi : cela t'évite à ce que les réponses se dispersent...
Tu ne fais pas d'extraction par kit? J'utilisais ChargeSwitch® gDNA Blood Kits de chez Invitrogen et ça marche très bien...sinon je commence normalement par la lyse des globules rouges plusieurs lavages( solution:Tris,MgCl2,NaCl)et puis celle des blancs par (Tris HCl,EDTA,Nacl, et SDS..proteinase K...aprés éthanol absolu ...
NB:je ne fais pas d'extraction par le chloroforme,enfin on l'utilise pas dans mon laboratoire.
cordialement
Cordialement,
