[Génétique] Obtention de sonde plasmide
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Obtention de sonde plasmide



  1. #1
    invited225709a

    Obtention de sonde plasmide


    ------

    Bon tout d'abord désolée si je ne suis pas très claire, mais la génétique pour moi c'est un peu du chinois, alors merçi d'avance si quelqu'un arrive a m'éclairer.
    Je suis un module de master recherche de biologie moléculaire-génétique.
    J'ai du choisir une protéine à étudier (chaine lourde de la dyneine axonemale- DNHA5)

    Le prof nous demande de simuler l'insertion dans un vecteur de clonage d'une sonde à partir de l'ARNm de la protéine.
    1) Est ce que quelqu'un peut m'expliquer le but de la maneuvre?
    2) Je ne trouve aucun enzyme de restriction qui corresponde entre mon ARNm et les différents vecteur de clonage disponible sur le marché. Comment faire? Selon mon prof c'est très simple (pour lui tout est simple) il suffit juste de choisir un plasmide et deux enzymes de restriction au pif, et de rajouter les nucleotides correspondant aux 2 bout de ma sonde! Comment je fais ca moi?

    -----

  2. #2
    piwi

    Re : Obtention de sonde plasmide

    Bonjour,
    Rapidement quelques pistes

    1. Faire une sonde d' in situ ou de northern blot par exemple.
    2. TA ou GC cloning ne nécessitent pas d'avoir des sites de restrictions interessants dans l'insert. Si vous ne voulez pas utiliser ces solutions, pensez à la PCR

    Cordialement,
    piwi
    Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.

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