Salut à tous !
J'étudie l'intéraction entre une kinase et un substrat potentiel. Lorsque j'essaye une IP sur mes cellules, la molécule supposé substrat devient insoluble au tampon de lyse alors qu'elle ne l'est pas quand les cellules ne sont pas cotransfectée avec l'enzyme. Quand je fais un blot sur le culot je ne vois la protéine (substrat) en fragment. Que dois en conclure?? Une éventuelle phosphorylation peutêlle rendre le substrat insoluble au np40???
si vous avez besoin de plus de détail pour avoir un avis n'hésitez pas à me demander j'ai peut être étais brève !
Merci !