Electrophorèse et Western Blot

[invite6f6362db]

Bonjour à tous,

Je souhaite réaliser une électrophorèse SDS-PAGE sur un extrait de protéines.
Le problème étant que les protéines que je souhaite séparer sont de poids moléculaires très différents (par exemple : 500 kDa et 14 kDa).
J'aurais aimé savoir si il étais plus judicieux d'utiliser un gel d'acrylamide avec gradiant ou plutôt faire 2 gels (un à 7% et un à 14 % par exemple).

Après migration, je souhaite transférer les protéines sur une membrane de nitrocellulose.
Je voudrais utiliser une coloration pour colorer les groupements carbohydrates.
Auriez-vous des colorations à me conseiller ?

Merci.

Amicalement.

Sao.
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[inviteec077029]

Un gel à gradient serait l'idéal sinon si t'es vraiment sure de déposer et faire le gel exactement dans les mêmes conditions tu peux faire sur 2 gels séparés. Par contre si t'as vraiment besoin d'une quantification derrière je te conseille d'utiliser un même gel

[invitec9f0f895]

Salut

Laisse tomber tu n'arriveras jamais a voir les deux sur le meme gel.
Pour le 500KDa tu peux meme utiliser un gel d'agarose si tu veux...

Yoyo