voila jai une electrophorese ac la ladder, l'ADN nou purifié et l'ADN purifié.
Les 2 bandes se retrouvent au même niveau : il existe juste une différence de fluorescence (le non purifié est bcp + fluorescent)
comment faire pour determiner la quantification sur gel avant et apres purification
merci
Peux-tu expliciter un peu ce que tu demandes? Je ne comprends pas...
Cordialement,
An expert is one who knows more and more about less and less.
il faut estimer le rendement de purification
Et tu penses faire comment?
C'est à toi de le faire, non? Tu dois bien avoir quelques idées, surtout après ce qui t'a été expliqué dans un fil très semblable que tu avais lancé.
Cordialement,
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oui je vois bien qu'il faut se reporter à la ladder seulement les 2 bandes st au mm niveau ...
Oui, mais tu cherches une taille ou une quantité?
Fais un petit effort de réflexion, stp...
Cordialement,
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petit indice : la purification elle sert à quoi ?
Autre petit indice (dit autrement ce que je voulais exprimer dans mon post précédent) : la purification ne diminue pas la taille (en pb) d'une bande...
Cordialement,
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lol ok jai limpression detre un boulet mdr !!
on reprend !!!
la purification sert a eliminer les sels et tous les uatres trucs de la PCR pr apres pouvoir sequencer mon ADN.
mais là je vosi pas comment je peux quantifier une difference de fluorescence...
Salut!
Tu as deux variables possibles, "le niveau de migration" et "l'intensité de la bande", et je crois que tu n'es pas sure de ce à quoi elles correspondent, non?
Je pense que tu devrais l'avoir dans ton cours!
Dernière modification par sacharybalka ; 17/04/2008 à 14h51. Motif: problème finalement résolu il me semble
oui mais est il possible de quantifier la purification (en terme de chiffres) à partir d'une sipmle difference de fluortescence ?
grosso modo oui en regardant l'intensité de la bande purifiée devant celle avant purification. Deux fois plus petite? Trois fois? C'est à la louche.
Si tu veux être précise il existe des systèmes permettant de mesurer plus précisément la fluorescence.
Si tu veux être plus absolue tu peux te référer à la bande du ladder dont la quantité d'ADN devrait être connue.
Cordialement,
piwi
modération:
Ce genre de réflexion peut être blessante pour la personne à qui elle est destinée. Garde à l'esprit que tout le monde n'est pas nécessairement à l'aise avec la bio mol.Envoyé par MaliciaR
Merci d'éviter ces sorties, en tout cas en début de discussion.
Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.
Merci bcp à toi
