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Purification d'ADN



  1. #1
    missy12

    Purification d'ADN

    voila jai une electrophorese ac la ladder, l'ADN nou purifié et l'ADN purifié.

    Les 2 bandes se retrouvent au même niveau : il existe juste une différence de fluorescence (le non purifié est bcp + fluorescent)

    comment faire pour determiner la quantification sur gel avant et apres purification

    merci

    -----


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  3. #2
    MaliciaR

    Re : purification d'ADN

    Peux-tu expliciter un peu ce que tu demandes? Je ne comprends pas...


    Cordialement,
    An expert is one who knows more and more about less and less.

  4. #3
    missy12

    Re : purification d'ADN

    il faut estimer le rendement de purification

  5. #4
    MaliciaR

    Re : purification d'ADN

    Et tu penses faire comment?
    C'est à toi de le faire, non? Tu dois bien avoir quelques idées, surtout après ce qui t'a été expliqué dans un fil très semblable que tu avais lancé.

    Cordialement,
    An expert is one who knows more and more about less and less.

  6. #5
    missy12

    Re : purification d'ADN

    oui je vois bien qu'il faut se reporter à la ladder seulement les 2 bandes st au mm niveau ...

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #6
    MaliciaR

    Re : purification d'ADN

    Oui, mais tu cherches une taille ou une quantité?
    Fais un petit effort de réflexion, stp...


    Cordialement,
    An expert is one who knows more and more about less and less.

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  10. #7
    IngDr

    Re : purification d'ADN

    petit indice : la purification elle sert à quoi ?

  11. #8
    MaliciaR

    Re : purification d'ADN

    Autre petit indice (dit autrement ce que je voulais exprimer dans mon post précédent) : la purification ne diminue pas la taille (en pb) d'une bande...


    Cordialement,
    An expert is one who knows more and more about less and less.

  12. #9
    missy12

    Re : purification d'ADN

    lol ok jai limpression detre un boulet mdr !!
    on reprend !!!

    la purification sert a eliminer les sels et tous les uatres trucs de la PCR pr apres pouvoir sequencer mon ADN.

    mais là je vosi pas comment je peux quantifier une difference de fluorescence...

  13. #10
    sacharybalka

    Re : purification d'ADN

    Salut!
    Tu as deux variables possibles, "le niveau de migration" et "l'intensité de la bande", et je crois que tu n'es pas sure de ce à quoi elles correspondent, non?
    Je pense que tu devrais l'avoir dans ton cours!
    Dernière modification par sacharybalka ; 17/04/2008 à 14h51. Motif: problème finalement résolu il me semble

  14. #11
    missy12

    Re : purification d'ADN

    oui mais est il possible de quantifier la purification (en terme de chiffres) à partir d'une sipmle difference de fluortescence ?

  15. #12
    piwi

    Re : Purification d'ADN

    grosso modo oui en regardant l'intensité de la bande purifiée devant celle avant purification. Deux fois plus petite? Trois fois? C'est à la louche.
    Si tu veux être précise il existe des systèmes permettant de mesurer plus précisément la fluorescence.

    Si tu veux être plus absolue tu peux te référer à la bande du ladder dont la quantité d'ADN devrait être connue.

    Cordialement,
    piwi

    modération:
    Citation Envoyé par MaliciaR
    Fais un petit effort de réflexion, stp...
    Ce genre de réflexion peut être blessante pour la personne à qui elle est destinée. Garde à l'esprit que tout le monde n'est pas nécessairement à l'aise avec la bio mol.
    Merci d'éviter ces sorties, en tout cas en début de discussion.
    Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.

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  17. #13
    missy12

    Re : Purification d'ADN

    Merci bcp à toi

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