[Biologie Moléculaire] Purification d'ADN
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Purification d'ADN



  1. #1
    invitedaeea037

    Purification d'ADN


    ------

    voila jai une electrophorese ac la ladder, l'ADN nou purifié et l'ADN purifié.

    Les 2 bandes se retrouvent au même niveau : il existe juste une différence de fluorescence (le non purifié est bcp + fluorescent)

    comment faire pour determiner la quantification sur gel avant et apres purification

    merci

    -----

  2. #2
    invite17a570c1

    Re : purification d'ADN

    Peux-tu expliciter un peu ce que tu demandes? Je ne comprends pas...


    Cordialement,

  3. #3
    invitedaeea037

    Re : purification d'ADN

    il faut estimer le rendement de purification

  4. #4
    invite17a570c1

    Re : purification d'ADN

    Et tu penses faire comment?
    C'est à toi de le faire, non? Tu dois bien avoir quelques idées, surtout après ce qui t'a été expliqué dans un fil très semblable que tu avais lancé.

    Cordialement,

  5. A voir en vidéo sur Futura
  6. #5
    invitedaeea037

    Re : purification d'ADN

    oui je vois bien qu'il faut se reporter à la ladder seulement les 2 bandes st au mm niveau ...

  7. #6
    invite17a570c1

    Re : purification d'ADN

    Oui, mais tu cherches une taille ou une quantité?
    Fais un petit effort de réflexion, stp...


    Cordialement,

  8. #7
    invite8c0cc995

    Re : purification d'ADN

    petit indice : la purification elle sert à quoi ?

  9. #8
    invite17a570c1

    Re : purification d'ADN

    Autre petit indice (dit autrement ce que je voulais exprimer dans mon post précédent) : la purification ne diminue pas la taille (en pb) d'une bande...


    Cordialement,

  10. #9
    invitedaeea037

    Re : purification d'ADN

    lol ok jai limpression detre un boulet mdr !!
    on reprend !!!

    la purification sert a eliminer les sels et tous les uatres trucs de la PCR pr apres pouvoir sequencer mon ADN.

    mais là je vosi pas comment je peux quantifier une difference de fluorescence...

  11. #10
    invite98ab1ae6

    Re : purification d'ADN

    Salut!
    Tu as deux variables possibles, "le niveau de migration" et "l'intensité de la bande", et je crois que tu n'es pas sure de ce à quoi elles correspondent, non?
    Je pense que tu devrais l'avoir dans ton cours!

  12. #11
    invitedaeea037

    Re : purification d'ADN

    oui mais est il possible de quantifier la purification (en terme de chiffres) à partir d'une sipmle difference de fluortescence ?

  13. #12
    piwi

    Re : Purification d'ADN

    grosso modo oui en regardant l'intensité de la bande purifiée devant celle avant purification. Deux fois plus petite? Trois fois? C'est à la louche.
    Si tu veux être précise il existe des systèmes permettant de mesurer plus précisément la fluorescence.

    Si tu veux être plus absolue tu peux te référer à la bande du ladder dont la quantité d'ADN devrait être connue.

    Cordialement,
    piwi

    modération:
    Citation Envoyé par MaliciaR
    Fais un petit effort de réflexion, stp...
    Ce genre de réflexion peut être blessante pour la personne à qui elle est destinée. Garde à l'esprit que tout le monde n'est pas nécessairement à l'aise avec la bio mol.
    Merci d'éviter ces sorties, en tout cas en début de discussion.
    Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.

  14. #13
    invitedaeea037

    Re : Purification d'ADN

    Merci bcp à toi

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