Besoin d' aide pour coloration de gram

[invite6192925b]

bonjour voilà je susi en terminal STL et j' ai des difficulté lors de la réalisation des gram
en effet je n' ai quasiment jamais la bonne couleur pourtant je respecte les temps auriez vous des conseil pour m' aider?? merci beaucoup
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[invite21fe4521]

Salut !
Je ne sais pas trop d'ou peux provenir ton probleme ce que je sais simplement c'est que nous (iut bio) on ne respecte jamais les temps d'attente !
On mettais quelques gouttes de chaque colorant: crystal violet puis direct le lugol dessus sans rincer juste en basculant la lame pour laisser s'écouler les liquides, puis une décoloration à l'alcool jusqu'a la disparition du violet dans le liquide d'écoulement (enfin il peut en rester un peut c'est pas une science exacte lol). Et enfin le dernier colorant puis fini !
En clair on fait un peu a la rache les gram et cela a toujours marché !

Juste quelques conseils: bien refroidir la lame (si fixation a la chaleur) voir faire couler de l'eau sur la partie opposer de la fixation. Et faire attention avec l'alcool de ne pas trop decolorer quand meme (c'est un peu au filing).
En mois de 2 min le gram etais fait !

J'espere que cela va t'aider @+ tribi

[inviteea49608c]

salut ce que je peut te dire c'est qu'il faut s'assurer en premeir lieu d'avoir fait un bon isolement puis d'avoir realiser un bon etalement suivi d'une bonne fixation
il faut laisser votre lame a l'air pour qu'elle puisse bien refroidir
dans le bain de coloration on commence par le violet de gentiane laissez agir 1 a 2 min incliner la lame pour deverser le colorant qui sera remplacer aussi tot par de lugol "mordant" aprés decoloration par l'alcool pas trop comme meme " il faut que les gouttes deviennent transparante puis la fushin puis eau et c'est fini
j'espere avoir ete claire
a bientot

[invitee789f11c]

Bonjour,
Tout d'abord pourrais tu nous dire, quel couleur tu obtient généralement..
Violet foncé, rose très claire....

Il y a de nombreuse possibilité de non fonctionnement, la coloration de Gram est une technique assez difficile à obtenir correctement au début, comme il a été dit plus haut après chacun à sa technique aux fils des années..

Mais la cause du problème peut etre multiple :
=Mauvaise qualité des colorants
=Temps mal respecté meme s'il ne sont pas essentiels
=protocole non respecté
=Mauvaise fixation meme si ici, cela ne semble peut possible, vu qu'il y a présence de bactérie
=decoloration trop intense (je pencherais pour cette solution plutot^^)


Après, il faudrait nous décrire plus précisément la couleur, et/ou voir avec ton professeur ce qu'il en pense, ils trouvent souvent la cause^^
De plus, demandé s'il est possible de faire une séance supplémentaire pour vous exercez.
C'est assez embétant d'arriver le jour du bac, en sachant que sa technique de Gram n'est pas terrible!!!

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite6192925b]

oui en effet ça fait peur lol
pour la couleur cela varie mais generalment quand sa doit etre violet j' ai rose et inversement
j' en ai parler a mon prof de cette année ( un nouveau) et il a été surpris quand je lui ai dit que pour la decoloration je laissais 30 sec a l' alcool ( la lame posée sur le chevalet et recouverte d' alcool) il ma dit que lui il ne faisait pas comme ça que lui il faisait couler dessu à la pissette donc je vais tester mais si vous avez d' autre technique je suis preneuse!!!!

[invitee789f11c]

Oui, sa vient surment de là, la décoloration ce n'est pas plus de 5 secondes..
Il faut prendre la pisette et attendre que les gttes qui tombe de la lame ne soit plus coloré^^
Je pense que, sa devrait mieux marché^^
Bon courage