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Autoclaver glucose dans du milieu ?



  1. #1
    Pti'Boulon

    Question Autoclaver glucose dans du milieu ?


    ------

    Salut !

    J'ai besoin de vos lumières. Mon étudiant a mis du glucose dans du 2YT avant de passer le tout à l'autoclave ; j'ai toujours lu de le stériliser à part et de le rajouter après autoclavage mais je ne sais pas si c'est grave. Le milieu est plus foncé que d'habitude (caramel ? )
    Pensez-vous qu'on peut utiliser ce milieu quand même pour les BL21 (production d'une protéine recombinante) ? Il en a quand même fait 10L, ça m'embêterait de jeter ...

    Merci !

    -----

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  3. #2
    piwi

    Re : autoclaver glucose dans du milieu ?

    Oui votre glucose a caramélisé. En général après cette boulette on jete
    Maintenant vous pouvez essayer de faire pousser, je suis persuadé que ca doit marcher même si je n'ai jamais essayé

    Cordialement,
    piwi
    Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.

  4. #3
    Pti'Boulon

    Re : autoclaver glucose dans du milieu ?

    Ok merci ...
    Quelqu'un a déjà utilisé du milieu caramélisé comme ça ?

  5. #4
    IngDr

    Re : autoclaver glucose dans du milieu ?

    Oui, déjà essayé au tout début de mes études...., mais c'était pas 10L, c'était pour couler des boites pour faire pousser des bactéries. Les bactos ont poussé, mais bon, si c'est caramélisé, c'est que la réaction de Maillard (http://www.lc-maillard.org/PDF/SOMMAIRErecup.pdf) a eu lieu, et dans ce cas, le sucre et les acides aminés ont été modifiés. Des produits toxiques ont aussi pu être produit. Donc si c'est pour une production de protéine recombinante, je me méfierai quand même, car vous serez dans des conditions particulières.
    Un moyen de limiter les dégats si le glucose est déjà ajouté est d'autoclaver à 1/2 atmosphère.

    cordialement

  6. #5
    Pti'Boulon

    Re : autoclaver glucose dans du milieu ?

    merci pour l'info détaillée, on jette tout et on recommence !

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #6
    phycocyanine

    Re : autoclaver glucose dans du milieu ?

    MDR...il faut tuerces etudiants qui ont fait cette betise,par contre vous pouvez tester ce milieu,on sait jamais...

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  10. #7
    IngDr

    Re : autoclaver glucose dans du milieu ?

    S'il y a 10L de milieu, ce serait dommage de tout jeter, vous pourriez le garder pour des applications moins sensibles que la production de protéine.
    Notamment, vous pourriez autoclaver de l'agar dans de l'eau, et le mélanger au milieu (chauffé @50°C), afin de couler des boites.

  11. #8
    Pti'Boulon

    Re : autoclaver glucose dans du milieu ?

    J'ai fait des cultures dans mon milieu cette nuit, ça a poussé nickel (j'avais rajouté du glucose quand même). Donc je vais le garder !

    merci à tous

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