Test de biologie

[invite25b588fc]

Bonjour à tous!

Je voudrai comprendre comment on fabrique des protoplastes et connaître certaine de ses applications.

Merci de m'aider.
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[invite160a5434]

Bonjour,

Les protoplastes, si mes souvenirs sont bons,s ont des cellules végétales dénuent de leur paroi.

Pour les obtenir, il me semble que l'action d'une cellulase suffit, mais c'est a vérifier ou a confirmer.

Enfin, leur utilisation est essentiellement ciblé sur la génétique et l'introduction de gène, le clonage, etc. La paroi pectocellulosique étant une barrière souvent génante ...

[invite6487dc7f]

J'aimerais juste préciser que le terme protoplaste s'applique aussi aux bactéries ayant perdues leur paroi.

[MaliciaR]

Et dans le cas où il s'agirait d'une bactos Gram +, on élimine la paroi avec du lyzozyme (enzyme dégradant le peptidoglycane)

[A voir en vidéo sur Futura]

[IngDr]

Et puis les levures sans parois sont aussi appelées protoplastes...

[MaliciaR]

Et puis les levures sans parois sont aussi appelées protoplastes...

Tu veux en dire un peu plus? Je ne connais pas ça

Merci

[invitead282ff2]

On utilise aussi le lysosyme avec les gram -.
Par contre, pour E coli ainsi traité, on parle de sphéroplaste et non de protoplaste.
Les bacto ayant "perdues" leur membrane externe possède alors une forme sphérique et non plus de "batonnet".

[IngDr]

Tu veux en dire un peu plus? Je ne connais pas ça

Merci

Bon c'est un vieux souvenir de TP, je ne pourrais pu dire de manière exacte comment on avait procédé
J'ai trouvé un papier qui parle des protoplastes :

Surface Structure of Yeast Protoplasts

EVA STREIBLOVA

Received for publication 26 October 1967

The term "protoplast" means the living unit of the plant cell which lies within the cell wall and which in proper conditions can be plasmolyzed away from it. Kuster (11) has shown that the protoplast is able to survive if the cell wall is removed under proper conditions. He called these cells from which the cell wall had been removed "gymnoplasts." In microbiology, the
term "protoplast" has been established to describe bacterial forms in which the cell wall is entirely removed by the action of enzymes (3). For forms which retain remnants of the wall, the term "spheroplasts" is generally used (24). During the past decade, these terms have been generally accepted for bacteria as well as for yeasts. In the case of yeasts, evidence has not
been presented that the cell wall is entirely absent from the spherical units which are very sensitive to osmotic shock. The technique of freeze-etching, developed by Moor et al. (14), makes it possible to examine the surface structure of cell embranes and organelles, whereas conventional methods of electron microscopy did not allow this. Surface views of yeast plasma membrane were first published by Moor and Muhlethaler (13). The present work was undertaken to study the elated problems of cell wall architecture and of protoplast formation. In this report, the term "protoplast" is used for yeast forms which in freeze-etchings are entirely free from wall material, and the term "spheroplast" is used for forms which retain remnants of the original wall on the surface of the plasma membrane.

[MaliciaR]

On utilise aussi le lysosyme avec les gram -.
Par contre, pour E coli ainsi traité, on parle de sphéroplaste et non de protoplaste.
Les bacto ayant "perdues" leur membrane externe possède alors une forme sphérique et non plus de "batonnet".

Ouaip
Mais je crois que "protoplaste" dans ce cas est l'appellation historique.
La forme sphérique est obtenu quand tu les plonges dans une solution hypotonique?

Merci pour l'abstract, Ing

[IngDr]

Ouaip
Mais je crois que "protoplaste" dans ce cas est l'appellation historique.
La forme sphérique est obtenu quand tu les plonges dans une solution hypotonique?

Merci pour l'abstract, Ing

Les definitions dans l'intro de l'article que j'ai cité montrent des nuances sur les termes spheroplastes et protoplastes. Ca s'applique peut etre aussi au bactos ?

[MaliciaR]

During the past decade, these terms have been generally accepted for bacteria as well as for yeasts.

Les definitions dans l'intro de l'article que j'ai cité montrent des nuances sur les termes spheroplastes et protoplastes. Ca s'applique peut etre aussi au bactos ?

Oui! J'avais lu trop vite, shame on me

[doubleD]

salut

on en parle aussi pour les champi (autres que levure) dont on a digéré la paroi (avec une chitinase). C'est pratique pour faire des transfos après dessus. D'ailleurs on se sert également d'Agrobacterium, comme chez les plantes.
Tant que j'y pense, si quelqu'un sait si ça existe "naturellement" une transfo de champi par agrobacterium, je suis preneur.

Et au labo on en a qui ont fait des preps de mito dont ils ont enlevés la membrane externe (chez cerevisiae) et si je me rapelle bien ils appelaient ça sphéroplastes.

[invite25b588fc]

Bonjour!

Merci à tous pour votre aide je crois désormais avoir mieux compris ce que sont les protoplastes et qu'elle rôle ils jouent.

Encore merci!