Western Blot

[invite9a76c465]

Bonjour à tous,
J'aimerais savoir s'il y a une grande différence entre le PBS et le TBS.
Et le temps nécessaire pour les lavages? 3 ou 4x10 minutes?
Merci d'avance.

Adel
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[invite8c0cc995]

Pour certains anticorps on recommande le TBS plutot que le PBS. J'ai notamment vu cela pour des anticorps anti-phospho.
En ce qui concerne les temps de lavage, 3x10 min en 1ere intention est une bonne stratégie. Tu peux ensuite adapter en fonction de ton anticorps. Plus de lavage s'il y a des fixation aspécifiques, et du bruit de fond sur la membrane. Moins de lavage (en durée) si l'anticorps est très spécifique, que ton signal est fort, et donc que tu fais des expositions courtes.