production d'Ac monoclonaux
bonjour,
J'ai besoin des connaissances d'experts. Quelles sont les techniques de production d'Ac monoclonaux? Comment en faire en utilisant des animaux transgéniques. Mon objectif est d'isoler des cellules cancéreuses par cytométrie en flux en utilisant ces AcM marqués directement ou indirectement. Merci à tous pour vos réponses, toutes les idées sont bonnes à prendre
Salut,
La technique classique de production d'Ac monoclonale est la suivante.
Immunisation d'un animale avec l'Ag d'intérer.
récupération des Lb activés.
Dillution limite pour isolé les Lb.
Tester le surnageant de ces clones pour trouver le clone produisant un Ac spécifique et de forte affinité pour l'Ag considéré.
Enfin lorsqu'un Lb produit un bon Ac, on le choisit donc pour produire l'Ac monoclonale . ( 1 Lb= 1 Ac monoclonale ).
Le Pb est que les Lb ne se cultive pas. On le fusione alors av un myelome ( Lymphocyte cancéreux permettant une immortalisation de la cellule fusion Lb-myelome que l'on appelle dès lors Hybridome)
Lhybridome se cultive indefiniment et produit l'Ac monoclonale !
cordialement
