Erreur de taille sur SDS-PAGE

[inviteb79b6ae1]

Bonjour à tous,

J'ai deux petits problèmes. Tout d'abord je voulais savoir qu'elle erreur de mesure on fait lorsque l'on détermine la taille d'un fragment d'ADN sur une gel de SDS-PAGE avec 1.5% d'agarose. Je précise un peu mon idée, lorsque l'on mesure un fragment de 300 pb c'est à plus ou moin 20 pb?

Deuxièmement je voudrais savoir si il fallait un distance minimum de part et d'autre d'un site de restriction pour que l'enzyme clive le double brin d'ADN. Là aussi je précise mon idée: J'ai un site de restriction qui se trouve 71pb avant la fin du fragment d'ADN et je voudrais savoir si c'est possible que l'enzyme ne le vois pas??

Merci d'avance pour votre aide et bonnes fêtes.

RwG
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[invite7f64506a]

Salut,
Pour le SDS je ne sais pas.Mais pour la restriction, il ne devrait pas y avoir de problème.On peut bien creer des fragment PCR avec juste un site de clivage de chaque coté et les cliver ensuite.Je sais pas si mon exemple et très clair, mais toujours est-il que je suis quasi sur que ça ne posera pas de problème.
salut