Sds Page

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Bonjour à tous,

je viens de lire des messages précédents concernant le SDS PAGE, mais une question persiste cependant :

après traitement au SDS, detergeant anionique, les protéines sont uniformément chargées negativement et migrent donc en fontion de leur poids moléculaire uniquement. Mais peut on dire qu'elles migrent aussi en fonction de leur forme ?

le role du béta mercapto ou du DTT est de rompre les ponts dissulfures par réduction mais ces 2 composés rentrent ils obligatoirement dans la technique de SDS PAGE ?

merci !
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[invite4ff72fd5]

Le SDS charge uniformement négativement la protéine mais rompt également les liaisons ioniques de la protéines.

Le traitement au Beta mercapto ethanol se fera pour rompre les liaisons dissulfure et permettre ainsi une bonne migration.

Donc oui je pense que BET et DDt se font pour les elecrophoreses .

[invitead282ff2]

après traitement au SDS, detergeant anionique, les protéines sont uniformément chargées negativement et migrent donc en fontion de leur poids moléculaire uniquement. Mais peut on dire qu'elles migrent aussi en fonction de leur forme ?

Le SDS permet de justement ne pas tenir compte de la forme d'une protéine. En gros, quelque soit la forme d'une protéine, celle ci se déplace dans un gel de la même façon qu'une sphère de rayon hypothétique Rs, le rayon de Stoke.

Le traitement au SDS aligne les protéines en une sorte de batonnet, du au répulsion qu'exerce les charges des molécules de SDS.

Ainsi, tout les protéine adopteront une forme de batonnet....dont la longueur dépendra de la séquence primaire de la protéine, assimilable donc au poids moléculaire.

Voila pourquoi le SDS-PAGE ne tient pas compte de la forme de la protéine.

En gros...