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Biochimie Sds



  1. #1
    lyly

    Unhappy Biochimie Sds


    ------

    Coucou,
    La question que je pose est assez spécialisée, ça touche à la biochimie, j'espère qu'il y aura des biochimistes en herbe sur ce forum^^.

    Voilà, dans un exo, on étudie une protéine par gel filtration dans un tampon aqueux à pH=7 qui présente un poids moléculaire apparent de 160 000 daltons.On soumet cette protéine à une électrophorèse sur gel en présence de SDS.La révélation montre 2 bandes correspondant à des poids moléculaires apparents de 50 000 et 30 000.
    Je ne comprends pas cette différence de poids (quon me demande d'ailleurs d'expliquer..)..

    Merci!

    -----

  2. Publicité
  3. #2
    Guillmot

    Re : Biochimie Sds

    Hello,

    En électrophorèse sur gel avec SDS, tu es en conditions dénaturantes; ta protéine native était donc constituée de 2 types de sous-unités différentes qui forment 2 bandes sur le gel

    Il y a fort à parier que la protéine native compte 2 grosses sous unités (50 kDa) et 2 petites sous-unités (30 kDa) pour un total de 160 kDa !
    Compte à supprimer

  4. #3
    foxdie

    Re : Biochimie Sds

    salut
    en plus de se qu il a dit le sds charge tout les protienes négativment
    par mon prof je dit sa j ai des cours et séries excercices

  5. #4
    lyly

    Re : Biochimie Sds

    Merci Guilmot et Foxdie , mais ce que je ne comprends toujours pas, c'est pourquoi on a pas eu deux bandes avec une de 100kDa et une de 60kDa...parce que, dans un schéma du cours, quand tu as une molécule constituée de deux sous-systèmes A et B, une fois les ponts cassés entre ces deux systèmes, on obtient une bande A et une bande B(et non une demi bande A et une demi bande B).
    bise

    PS:Foxdie, si tu as des exos corrigés loà dessus, je suis preneuse

  6. #5
    Elendilmir

    Re : Biochimie Sds

    Et si ce n'etait pas un dimère mais un tétramère?
    2X30000+2X50000=160kDa...

    Edit : j'avais pas vu tout ton message Guillmot, toutes mes confuses...

    bon pour dire un truc intéressant, pourquoi tu considères deux demi bandes?
    c dur de comparer des intensités sur western blot...
    Dernière modification par Elendilmir ; 22/09/2006 à 19h12.
    Qui s'assied au fond d'un puits pour contempler le ciel le trouvera petit.

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #6
    Guillmot

    Re : Biochimie Sds

    Citation Envoyé par Elendilmir Voir le message
    Et si ce n'etait pas un dimère mais un tétramère?
    2X30000+2X50000=160kDa...

    Edit : j'avais pas vu tout ton message Guillmot, toutes mes confuses...

    bon pour dire un truc intéressant, pourquoi tu considères deux demi bandes?
    c dur de comparer des intensités sur western blot...
    Lol y'a pas de mal on est d'accord

    Citation Envoyé par lyly Voir le message
    Merci Guilmot et Foxdie , mais ce que je ne comprends toujours pas, c'est pourquoi on a pas eu deux bandes avec une de 100kDa et une de 60kDa...parce que, dans un schéma du cours, quand tu as une molécule constituée de deux sous-systèmes A et B, une fois les ponts cassés entre ces deux systèmes, on obtient une bande A et une bande B(et non une demi bande A et une demi bande B).
    bise
    Bonsoir lyly, si tu avais eu deux bandes à 100 kDa et 60 kDa, il y aurait eu dans ce cas un dimère de deux sous-unités Si celà peut te rassurer, l'exemple de ton cours est très schématique, après chaque polymère a ses particularités

    Dans l'absolu vu les données initialement postées, ça me semble juste un exercice de compréhension globale d'une électrophorèse de type SDS-PAGE. Le but ici est de séparer les différentes sous unités par le poids moléculaire. C'est l'avantage du SDS qui confère une charge négative à chaque sous-unité et qui permet de les dissocier lors de l'electrophorèse uniquement en fonction de leur poids. Bien entendu, le SDS dissocie les interactions faibles uniquement. Pour casser des liaisons covalentes entre chaînes peptidiques comme dans le cas de liaisons S-S (disulfures), il te faudra utiliser un réactif supplémentaire comme le béta-mercaptoéthanol. J'espère que tu saisis mieux ce chapitre d'analyse biochimique

    PS: sympa le méta-quote ...
    Compte à supprimer

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  10. #7
    lyly

    Re : Biochimie Sds

    Ca y est, merci, j'ai compris(et la lumière fut!!!).
    Merci tous les trois,c'est vraiment sympa.

  11. #8
    foxdie

    Re : Biochimie Sds

    salut
    je crois que oui patiente quelques jours et je te les envoi car je suis entraine de passé les exams

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