Ogm

[invite45d30017]

bonjour
je veux avoir des documents ou des liens sur le pcr et le test elisa
merci
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[Cendres]

Bonjour,

Tapez sur Google "PCR" et "test Elisa" et vous aurez plein de liens et documents.

[piwi]

Vous pourriez sans doute être plus précis sur vos demandes... On ne voit pas vraiment le lien avec les OGM et je ne vois pas pourquoi ce serait à nous de deviner ce que vous cherchez réellement.

[invite45d30017]

ce que je cherche exactement est un protocole detaillé de la la part d'un biologiste des tests elisa et de la pcr
merci

[A voir en vidéo sur Futura]

[piwi]

Il y a à peu près autant de protocoles que d'expérimentateurs.
Il y a belles lurettes que je n'ai plus fais d'elisa à la main donc là je n'ai plus de protocole précis. Pour les PCR c'est assez simple. Un mix 10 mM dNTP, BSA 1µg/µl, une paire d'oligos nucléotides dirigés contre votre gène d'intérêt (un sens et un anti sens), pour des 20 mer on mets 5 ng/µl. De la Taq 0.05U/µl et évidemment votre ADN pas trop concentré (personnellement je ne le dose pas).

Vous mettez tout cela ensemble dans un tube et en route pour le thermocycler pour entre 25 et 40 cycles. Le réglage dépend de vos oligos et de vos attentes. Classiquement on a un préchauffage à 95°C durant 2-5 minutes. Puis les cycles (dénaturation 95°C 30 secondes, hybridation 60°C 30 secondes, et élongation 72°C 30 secondes).

Voilà, vous avez fait votre PCR.

Cordialement,
piwi