Bonjour,

On a réalisé une chromatographie sur gel d'exclusion en TP. Le but était de déterminer la masse moléculaire de la LDH de muscle de porc (130 kDa d'après google). On a donc fait passer plusieurs standards, et l'enzyme.

Après on a deux méthodes pour trouver sa masse moléculaire. Soit on trace une droite reliant le log(MM) des standards en fonction de leur volume d'élution et dans ce cas on trouve 85 kDa pour la LDH. Soit on passe par le Kav (défini dans notre poly comme (Ve-V0)/(Vt-V0) ce qui correspond au coefficient de partage), et dans ce cas, on trouve 123 kDa.

Les résultats sont ce qu'ils sont. Le problème c'est que c'est la même valeur de volume d'élution qui me donne soit 85kDa soit 123kDa... Je ne comprend pas d'où vient une telle différence. Comme je sais que la LDH fait environ 130 kDa, je suppose que la deuxième méthode est plus précise, mais pourquoi ?

Merci d'avance