Analyse réponse humorale par ELISA

[invitee8702407]

Bonjour à tous,

Lors d'un TP j'ai effectué un ELISA.
Pour la révélation, nous avons utilisé un anticorps secondaire couplé à la phophatase alcaline (AP) puis nous avons ajouté le substrat (PNPP) de cette enzyme. Jusque là tout va bien. Ce que je ne comprends pas, c'est pourquoi nous avons dilué le substrat dans du tampon diéthanolamine.

Quel est le rôle de ce tampon?

Merci,
Didie

(Si ça peut vous aider, je suis en L3 biologie Cellulaire)
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[inviteb6144ea4]

Bonjour,

je ne serais pas d'une grande aide mais le seul élément que je peux apporter à ta question c'est que le tampon diéthanolamine a remplacé le tampon glycine/NaOH car il s'est révélé plus efficace. En quoi? Je ne sais pas.
Il permet de maintenir un pH basique indispensable au bon fonctionnement des phosphatases alcalines nécessaires à la réaction

Cordialement

[invitee8702407]

D'accord je vois. Merci pour cette réponse et ces précisions en tout cas!