quel sont les points de comparaison eventuel ,entre un dosage de proteine avec la methode de brad ford ,et un dosage par elisa indirect ,c'est pour une conclusion general
Tu as pourtant dû certifier l'avoir fait en t'inscrivant.
"bonjour" dsl mais jetai legerement paniqué ,je ferai attention derien avant merci
10/04/2009, 17h24
#6
invitede8315b3
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Re : dosage des proteines
bonjour,
elisa: 1_sensibilisation des microplaque avec l'antigene,incubation une nuit a 4°c ,2_lavage de l'excés non fixé au PBS...3_inoculation de l'anticorp(AC) a detecté,incubation a 37°c pendant 10mn...,4_lavage de l'excés non fixé,5_ajout de PBS 5% de lait ecremé pour saturer tout les sites libre...incubation...6_ inoculation des AC de detection couplés a la peroxidase...incubation..lavag e...7_ajout de la solution de lenzyme peroxidase...lecture sur le lecteur elisa a 495nm
bradford: 1_solution de proteine reference BSA dans des tubes a concentration ascendante ,volumes finaux egaux ajuster avec du NaCl, 2_solution de la proteine a doser (x) dilué, 3_ reactif de bradford que l'on ajoute dans les tube ,meme dans le banc (qui ne contien rien) ,..courbe detalonage
10/04/2009, 17h28
#7
invitede8315b3
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janvier 1970
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Re : dosage des proteines
bonjour,
une reponce si possible ,je doi faire une conclusion ,merci