[Biochimie] polymérisation de l'acrylamide dans les puits
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polymérisation de l'acrylamide dans les puits



  1. #1
    invitec243f673

    polymérisation de l'acrylamide dans les puits


    ------

    Bonjour à tous !

    Je fais pas mal de western blot en ce moment, et j'ai un problème récurrent. Je retrouve de l'acrylamide polymérisée dans mes puits, ce qui pose problème lors du dépot de mes échantillons.

    J'ai déjà posé la question à plusieurs collègues mais personne n'a su résoudre mon problème.

    Est-ce que quelqu'un aurait une explication à me proposer ?

    -----

  2. #2
    inviteb3a6feac

    Re : polymérisation de l'acrylamide dans les puits

    Bonjour!

    Tiens, ça me fait me poser une question, le PAGE peut-il périmer ?
    Sinon je n'en ai aucune idée, ce n'est qu'une piste.

  3. #3
    invitec243f673

    Re : polymérisation de l'acrylamide dans les puits

    Le PAGE c'est-à-dire ?
    Le gel ?
    Les solutions mères sont refaites régulièrement, et en plus, d'autres personnes utilisent les mêmes sauces et même matériel et n'ont pas forcément ce problème...

    Je dois donc faire quelque-chose qui ne faut pas, mais je ne vois pas quoi...

  4. #4
    invite4ff72fd5

    Re : polymérisation de l'acrylamide dans les puits

    Je pense qu'il n'y rien a faire... Le truc c'est de sortir les peignes le plus verticalement possible, et après de prendre une seringue à aiguille fine et de pousser/sortir l'acryl qui a polymérisé dans le puit, mais bon si tu fais un gel de stacking ca pose peu de probleme.

  5. A voir en vidéo sur Futura
  6. #5
    invitea0443c8c

    Re : polymérisation de l'acrylamide dans les puits

    Bonjour!
    Oui ce genre de problème est effectivement assez handicapant et peut s'avérer délétère pour le dépot et pour l'analyse finale mais le nettoyage des puits avant dépôt doit permettre de résoudre cela. Un truc que tu peux faire est nettoyer les peignes (avant de les mettres dans le staking) avec du SDS qui par des phénomènes de tension de surface (mais là je deviens incompétent) va permettre d'avoir des puits bien formés.

    V.

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