Bien le bonjour à tous, je fais de la mutagenèse avec le kit quickchange XL de stratagene et j'aurais 2 questions:
- J'ai vu sur le site qu'il était possible de deleter un aa (3 nucléotides) avec ce kit, mais comment je construit mes amorces? Est ce que je fais comme pour une substitution en enlevant les 3 nucléotides que je veux virer ou faut il que je parte de plus loin ou autre?
- Savez vous jusqu'à combien de nucléotides peut on déleter?
Merci d'avance pour vos réponse.
exactement tu déletes les 3 nucléotides.Envoyé par lashwar
A priori il n'y a pas de limite.- Savez vous jusqu'à combien de nucléotides peut on déleter?
Merci d'avance pour vos réponse.
Ceci dit une facon "simple" de faire des déletions, est de choisir les amorces de part et d'autre de la régions a déléter et de faire une PCR classique, suivie d'une phosphorylation et d'une ligation.
YOyo
ok, merci pour cette réponse claire et rapide.
J'vais me la tenter avec kit de muta et si je me galère, je passerai par PCR classique
