Répondre à la discussion
Affichage des résultats 1 à 3 sur 3

the Genome walking method



  1. #1
    bioamb

    Question the Genome walking method


    ------

    bjr , j'ai besoin d'aide concernant the Genome walking method. particulièrement interessée par protocol for the GenomeWalker kit by Clontech.
    merci

    Etant sur un forum francophone, évitez de mélanger anglais et français dans vos messages. Faites au moins un effort de traduction si les informations que vous trouvez sont en anglais.

    LXR

    -----
    Dernière modification par LXR ; 07/06/2009 à 18h11.

  2. 📣 Nouveau projet éditorial de Futura
    🔥🧠 Le Mag Futura est lancé, découvrez notre 1er magazine papier

    Une belle revue de plus de 200 pages et 4 dossiers scientifiques pour tout comprendre à la science qui fera le futur. Nous avons besoin de vous 🙏 pour nous aider à le lancer...

    👉 Je découvre le projet

    Quatre questions à explorer en 2022 :
    → Quels mystères nous cache encore la Lune 🌙 ?
    → Pourra-t-on bientôt tout guérir grâce aux gènes 👩‍⚕️?
    → Comment nourrir le monde sans le détruire 🌍 ?
    → L’intelligence artificielle peut-elle devenir vraiment intelligente 🤖 ?
  3. #2
    rouskaou

    Re : the Genome walking method

    Bonjour,
    la marche sur le chromosome est une technique permettant le séquençage des régions amont et aval d'une séquence connue d'ADN.

    1) Purification de l'ADN génomique
    --------------------
    2) Digestion de l'ADNg par une enzyme de restriction

    RE----RE RE--------RE RE---RE

    3) Ligature en condition dilluée à 4°C pour favoriser l'auto-circularisation des fragment d'ADN (même site de restriction).
    ----------
    l l
    l l
    ----RE---

    4) Les ligatures servent ensuite de matrice à des PCR, les amorces utilisées seront divergentes pour amplifier l'ADN circulaire.
    <- ->
    -----------
    l l
    l l
    ----RE----


    5) L'amplicon purifié est soumis au séquençage (proprement dit) avec l'amorce adéquate afin de séquencer le coté inconnue.

    Voila, en espérant que c'est clair!

  4. #3
    wishangel

    Re : the Genome walking method

    Salut,

    En fait le genome walking avec le kit clontech est un peu différent.
    La première étapes consiste a construire une banque de fragment tagé (restriction et ligation du tag). Et après y a une PCR et une nested a faire, avec une amorce spécifique de ta séquence connu et une amorce spécifique du tag.
    Mais en fait en quoi a tu besoin d'aide? J'ai deja utilisé le kit donc je suis disponible si tu as des question.

    Bonne journée

Discussions similaires

  1. walking on the moon...
    Par xav72 dans le forum Matériel astronomique et photos d'amateurs
    Réponses: 27
    Dernier message: 17/04/2008, 10h07
  2. Walking on Mars....
    Par Tawahi-Kiwi dans le forum À la conquête de Mars
    Réponses: 12
    Dernier message: 25/05/2006, 01h29
  3. Gold Chloride method
    Par namou dans le forum Chimie
    Réponses: 6
    Dernier message: 14/12/2004, 08h31
  4. removal method
    Par mumu¤ dans le forum Environnement, développement durable et écologie
    Réponses: 2
    Dernier message: 09/07/2004, 14h07
Découvrez nos comparatifs produits sur le sport et la santé.