Bonjour,
Je commence un nouveau stage depuis peu et le labo travaille sur des cellules souches mésenchymateuses. Une manip consiste à les transfecter stablement avec le plasmide pcdna3 ou pcdna3.1 afin d'exprimer stablement une protéine (donc sous contrôle du promoteur fort CMV)
Le soucis est qu'ils ont pu remarqué depuis quelque temps l'expression du gène tend à diminuer au bout d'un moment, et que donc l'expression constitutive ne l'est plus tant que ça...
Est ce que quelqu'un a déjà eu ce type de soucis avec ce plasmide, voir en combinaison avec ce type de cellule?
Connaissez vous la différence entre pcdna3 et pcdna3.1, à part les variations des sites de restriction?
Merci beaucoup
rotkappchen
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