vecteur de clonage

[invite6e00ad7f]

Salut tout le monde!

voilà, j'ai une question à vous posez ( ça tombe bien ).

Pourriez-vous me dire quels sont les caractéristiques d'un vecteur de clonage chez les mammifères?

Moi je pense qu'il s'agit :
- du promoteur (avec séquence UAS et boîtes TATA)
- du polylinler (ou cassette de clonage)
- d'une séquence tag (facultative)
- d'une séquence poly A (=signal de polyadénilation)
- d'un terminateur transcriptionnel
- d'un gène de sélection pour les levures (on joue sur l'auxotrophie)
- d'une origine 2µm
- de l'origine d'E.coli
- du gène de sélection de E.coli
- et un gène de résistance (à un antibiotique par exemple)

Est-ce suffisant, est-ce à compléter, ou est-ce qu'il y a des éléments qui ne servent à rien???

Merci à tous,

Damien
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[Yoyo]

bonsoir

- d'un gène de sélection pour les levures (on joue sur l'auxotrophie)
- d'une origine 2µm

Cela est totalement inutile dans le cas d'un vecteur mammifere, vu que tu n'utilises pas la levure.

- du gène de sélection de E.coli
- et un gène de résistance (à un antibiotique par exemple)

C'est la meme chose! la majorité des genes de selection chez E. coli sont des genes de resistance aux antibiotiques.

Ca depends ensuite si tu veux faire des transfections stables ou transitoire. Dans le premier cas il te faut un moyen de selectionner les clones ayant integré le transgene (donc un gene de resistance, au G418 par expl). Dans le cas d'une transfection transitoire pas besoin.

Yoyo

[invite6e00ad7f]

Je te remercie pour cette réponse Yoyo,
je t'avoue que je m'en doutais un peu à propos des caractéristiques du vecteur de clonage chez la levure, mais je m'étais dis que je ne risquais rien en les citant quand même, et grâce à ça je ne ferai plus la confuusion désormais.
Comme quoi il y a du bon dans le mauvais !

A la prochaine,
Damien