DOT Blot quantitative

[invite9956950d]

est ce que vous pouvez SVP m'expliquer ou me fournir un lien concernant la DOT BLOT quantitative
surtout l'analyse des images
et comment limiter les les hybridation non specifique
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[Flyingbike]

tu parles de protéines ou d'acides nucléiques ? Pour limiter les hybridations non spécifiques, on sature les sites potentiellement capables de lier ta sonde ou ton anticorps, avec des protéines du lait ou de la BSA pour les portéines, avec des polymeres comme le DIDC ou de l'ADN de sperme de saumon ou de hareng pour les acides nucléiques.

Par rapport à l'annalyse des images, il y a de nombreux logiciels, souvent fourni avec le matériel de capture, qui permet de sélectionner manuellement ou automatiquement des zones de dépot, et ensuite d'évaluer des quantités par densitométrie.

[invite9956950d]

merci pour la reponse
je parle d'ADN plus precisement de l'ADN satellite
pour la saturation est ce qu'on peut utiliser de l'ADN d'E Coli
est ce que vous avez un document detaille
merci encore

[Jean-Luc P]

En général comme ADN non spécifique pour des analyses sur des eucaryotes, on utilise de l'ADn issu de sperme de poissons comme le saumon, car il y a une bon ratio ADN/autres molécules (donc pas cher).
Mais il est possible que cela ne convienne pas à ton protocole.. A toi de voir en fonction de ce que tu cherches à montrer.

[A voir en vidéo sur Futura]