Comment pRb peut-elle augmenter l'activité d'un promoteur ?

[invitee05f2589]

Bonjour à tous ! Tout d'abord : Bonne année

Voilà mon souci (désolé si c'est long, mais c'est, je pense, nécéssaisre pour comprendre le problème ^^) :

Grâce à une méthode de marquage d'un seul des 2 brins d'ADN suivie d'une digestion avec une très faible quantité de DNase d'ADN incubé avec C/EBP5 seul ou C/EBP5+Rb on conclut que c'est 2 facteurs se fixent sur un même module :GC
Or je croyais que Rb se fixait sur E2F...

De plus, grâce à un système rapporteur Luciférase, on mesure l'activité d'un promoteur Y qui ne contient pas de module E2F et DP. Cette activité est mesurée seul, en présence de facteur C/EBP5, et en présence de C/EBP5+Rb. Les résultats montrent que l'activité Luciférase est nettement supérieure en présence de Rb;
Or je croyais que Rb avait comme rôle d'inhiber la transcription

Ya t-il quelqu'un qui puisse répondre à ces interrogations ?
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[nowell]

Bonjour

C'est en effet très curieux, j'ai les mêmes connaissances que vous.
Rb se fixe sur le complexe E2F empêchant ainsi l'activité de polymérase et de transcription.

De plus je ne comprends pas très bien votre expérience.
Il ya aurait éventuellement une co-action EBP5 Rb ...

[invitee05f2589]

La première expérience consiste à digérer l'ADN de façon aléatoire : la DNase va donc couper partout, sauf là où est fixé le ou les facteurs. On a donc des fragment de toutes tailles. Ensuite un "trou" est visualisé par électrophorèse, qui correspond à l'endroit où se fixe le facteur. Or avec cette expérience on remarque le même "trou" avec C/EBP5 et avec C/EBP5+pRb.
J'en ai déduit que pRb se fixe sur C/EBP5...

[invitee05f2589]

En plus les facteur C/EBP sont censés se fixer sur le module CAAT

[A voir en vidéo sur Futura]