unité taq DNA pol

[invite59cd858d]

bonjour tous le monde
dans mon mix PCR est écrit 2U/µl ,
- que veut dire cette unité
- comment mesuré ce volume ? (c'est en microlitre avec la micropipette)
merci d'avance

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[piwi]

Bonjour.

La definition de l'unité enzymatique des Taq polymérases varient légèrement d'un fabriquant à l'autre. Mais en gros, on peut dire qu'une unité correspond à la quantité d'enzymes permettant l'incorporation de 10-15nmol de dNTP dans un fragment d'ADN en 30 minutes et à 75°C.

Et oui, les µl se mesurent avec les pipettes de laboratoire (classiquement P10 ou P20. J'ai vu une fois une P5)

Cordialement,
piwi

[Flyingbike]

Pour les enzymes on utilise même des P10 et des P2 qui descendent a 0,2µL avec précision, la P20 ne permet pas par exemple d'ajouter 0,5µL de Taq dans un tube. Je vous donne la définition d'une unité chez invitrogen : "One unit incorporates 10 nmol of deoxyribonucleotide into acid precipitable material in 30' at 74°C." mais comme l'a dit piwi c'est toujours a peu près la même chose...

[invite59cd858d]

merci a vous deux

[A voir en vidéo sur Futura]