Contamination par les Champignons

[invitec44a9718]

Bonjour à toutes et à tous
Etant étudiant en thèse, j'affronte actuellement un grand probleme, car, je travaille sur des cultures de cellules du melanome , mais malheureusement, ça fait un mois que je commence à voir sous le microscope, une sorte de filaments (un ou deux par flask) et qui disparaissent parfois apres repiquage des cellules. des collaborateurs du labo me disent que c'est des champignons et il faut tout javéliser ( ce qui représente une catastrophe pour moi) , mais d'autres me disent que le champignons donnent en principe un texture nuageuse au milieu de culture, ce qui n'est pas le cas pour moi.
Don, j'aimerai bien savoir si quelqu'un a déja connu ce probleme, et si ces filament sans des champignons ou non
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[piwi]

Il faudrait mieux les observer mais il est possible que ce soit effectivement des champigons. Maintenant si vous repiquez des boites très confluantes, il arrive qu'il reste des amas de cellules qui se collent au fond des boites. Regardez aussi sous la boite , des fois ce sont simplement des poussières.
Maintenant, si effectivement ce sont des conta, la solution est malheureusement la javel....

Cordialement,
piwi

[invite71f23525]

Il y a autre chose c'est que les cellules de mélanome produisent des dendrites. Parfois, on observe des fragments de dendrites détachés des cellules qui peuvent être assez longs, fins et sombres. Le mieux serait que tu prennes une photo et la poster sur le forum pour que l'on puisse t'aider à l'identification de ces filaments.

Greg

[invitec44a9718]

Rebonjour

Je vous remercie de vos réponse, ainsi je tiens à vous informer que j'essayerai de trouver le materiel pour prendre un photo, cependant, je vous invite à voir cette image qui pourrait peut être vous donner une idée de la situation ( sachant que le rapport entre la taille des cellules et les filaments, et le rapport de densité est le même en réalité, ainsi que la forme des filaments)
http://www.mediafire.com/file/4k1nz2...tamination.doc

NB:les filaments ont le même couleur que les cellules (plus ou moins transparents)
une de mes collègues qui pensent que c'est des champignons suppose que la disparition des filaments de temps en temps est du à leur fragmentation en spores qui selon elle, vont se transformer à leur tour en filaments et envahir le milieu, mais sachant que ça fait plus qu'un mois que j'ai constaté ce phénomène, et il n'ya toujours rien ( milieux de culture limpides....) est ce que cela vous semble en ma faveur.

Je vous remercie d'avance pour vos réponse qui me seraient très précieuses.
Bien amicalement

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite71f23525]

Vu ton schéma approximatif, il y a fort à parier que les filaments que tu vois sont :

- Soit des dendrites détachés du corps cellulaire,
- Soit des mélanocytes, en effet il y a parfois des cellules qui orientent leur morphologie toute en longueur avec un léger renflement au niveau du noyau. Ce n'est pas très commun, en tout cas ces cellules sont la plupart du temps très réfringentes par rapport aux autres.

Vu qu'ici ces filaments sont de même couleur et aspect que les cellules, ce sont certainement des dendrites. Les champignons filamenteux apparaissent, pour ce que j'ai pu voir, comme des filaments de forme plutôt cylindrique, des contours assez épais, très longs (centaine de µm minimum) et une forme irrégulière, avec des sortes de cassure irrégulières, comme ici :

http://podospora.igmors.u-psud.fr/im...odo_photo1.jpg

http://cgdc3.igmors.u-psud.fr/microb...s/image037.jpg

http://cgdc3.igmors.u-psud.fr/microb...s/image031.jpg

Ces images sont prises de l'Université Paris Sud.

En attendant tes photos,

Greg

[invitec44a9718]

Je vous passe mes plus vifs remerciements Greg pour cette réponse très réconfortante, sachant que j'essayerai de mon mieu d'avoir les photos.

Amicalement