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ARNm et résistance à la température



  1. #1
    imenely

    Question ARNm et résistance à la température

    Bonjour,
    Est-ce que les ARNm résistent aux températures élevés de l'ordre de 90°-100°C? En fait je teste un protocole de lyse cellulaire par congélation/décongélation pour extraire les ARN ensuite.

    -----


  2. Publicité
  3. #2
    piwi

    Re : ARNm et résistance à la température

    Les cycles de congélation ne sont pas bons du tout pour les ARN. La congélation/décongélation/sonication c'est pour les protéines, pas pour les ARN.
    Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.

  4. #3
    kamor

    Re : ARNm et résistance à la température

    A ma connaissance les seuls ARNm assez costauds pour résister à ce genre de traitements seraient ceux des moisissures, et encore.
    Sinon les ARNm son plutôt travaillés dans la glace, les RNases étant des protéines se retrouvant partout et très difficile à inhiber complètement. L'important dans ce genre de manip, c'est le froid et la rapidité. On m'a toujours dit que la demi vie des ARN bactérien était de quelques minutes à t° ambiante et vu la complexité de l'extraction, j'ai jamais cherché à affirmer ou infirmer celà
    Mais même l'ADN, considéré comme plus stable, a une durée de vie assez réduite à des températures pareilles.

  5. #4
    imenely

    Re : ARNm et résistance à la température

    Ok, en fait c'est un protocole que j'ai trouvé pour faire une qRT-PCR sur une seule cellule. Cependant j'ai rajouté un inhibiteur de RNase, je verrais ce que ça donne...
    Merci pour vos réponses

  6. #5
    kamor

    Re : ARNm et résistance à la température

    Les acides nucléiques sont souvent dégradés par les cycles de congélation / décongélation, de par la formation des cristaux de glace. Après ça dépend du nombre de cycles dont on parle bien évidemment.

  7. A voir en vidéo sur Futura

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