Bonjour
Je suis en train de suivre des souris transgéniques GFP par qPCR.
Je calcule l'expression de la GFP et une référence interne CD8 puis je compare le rapport GFP/CD8 au même rapport chez des souris connues pour avoir 1 ou 2 copies; j'en déduis donc mon nombre de copies. Seulement voilà: si en F0 je peux avoir 0,2 copies (mosaïcisme: 1 cellule sur 5 une copie ou 1 sur 10 2 coies par ex) quand je croise les souris (la F1 est issue de FOxWT, puis croisement des decendants) je me retrouve en F3 ou F4 avec un nombre de copies <1!!
Par ex en F3 le père 1 copie, la mère 0,5 copie et j'ai des souris à 0,7 ou 0,3/0,4 copies!! comment est-ce possible?
d'autre part 1 copie en F3 c'est bien un hétérozygote? cad une copie sur un allèle et absent sur l'autre chromosome??
où est l'incompréhension??
merci d'avance
bien cordialement
-----