bonjour,
J'ai la correction d'un exercice sur la culture cellulaire et je ne comprend pas vraiment les calculs si quelqu'un pourrais m'aider ...
voici l'ennoncé (j'ai compté 52 cellules dans 6 rectangle):
3-2-4 Une culture de cellules L 929, au plateau de densité, dans un flacon de 25 cm2 de surface utile (sur
laquelle peuvent se multiplier les cellules), est remise en suspension selon le protocole décrit dans le
document 4.. 9 cm2 de suspension cellulaire (S1) sont alors recueillis. Le résultat de l'observation X 190 de
S1 à l'hématimètre de Malassez (volume total 1 mm3) est fourni par le document 5.
Déterminer la concentration exacte de la suspension S1.
Quelle était la densité surfacique de cellules dans le flacon avant trypsinisation ?
N.B. - Caractéristiques de la cellule de Malassez : Hauteur 0,2 mm
Surface quadrillée (grand rectangle) 5 mm2
Nombre de rectangles dans le quadrillage 100
Distance entre deux lignes 50 μm
voici le corrigé:
3-2-3 Document 5 : dénombrement n = 52 cellules dans 6 rectangles
N = 52 X 1/4 X 100 x 1000 X 9 = 7,8.106 cellules dans les 9 cm3 de suspension cellulaire S1
Soit pour S1 : 0,87.106 cellules.cm-3
Densité surfacique (rappel surface = 25 cm2) D = 31,2.104 cellules.cm-2
3-2-4 Volume total = S X h soit 175 X 0,5 = 87,5 cm3
Concentration cellulaire = 3,5.105 X 1/87,5 = 4.103 cellules.cm-3
Dilution finale = 4.103/0,87.106 = 1/217
Protocole de réalisation :
9 milieu neuf : 87 cm3
10 suspension S1 : 0,4 cm3
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