Cytométrie en flux

[invite6116f37c]

Bonjour,
Quelqu'un pourrait-il m'expliquer le rôle d'un Anticorps irrelevant?
Merci d'avance
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[Edelweiss68]

Bonjour,

Voir par ici, http://forums.futura-sciences.com/bi...-relevant.html

En gros, c'est un anticorps se fixant de façon non spécifique et servant de contrôle isotypique.

[invite7249a892]

Hello;
Voici aussi quelques liens qui montrent les domaines d'utilisation des anticorps irrelevant:
http://cat.inist.fr/?aModele=afficheN&cpsidt=207458
http://www.em-consulte.com/article/189681
http://www.em-consulte.com/article/209979
http://www2.ujf-grenoble.fr/pharmaci...recherche.html
http://www.ipmc.cnrs.fr/fichiers/rec...lorisation.pdf
Cordialement,
Katie.

[invite6116f37c]

Je vous remercie beaucoup pour vos réponse.
On m'a expliquer qu'avant de lire la présence ou non des marqueurs en cytométrie de flux il faut d'abord cibler la population blastique et cibler la population négative grâce a un irrelevant. Je ne comprend pas comment ca marche. Pourriez vous m'aider?

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite6116f37c]

En fait je voudrais savoir sur quoi se fixe cet irrelevant

[sansplomb]

Bonjour,

Il se fixe, de façon non spécifique (par la partie Fc de l'anticorps généralement), sur les cellules.


cordialement

[invite6116f37c]

Merci.
Mais je n'arrive pas a expliquer que l'irrelevant constitue un controle négatif puisqu'il se fixe tout de meme à la cellule et va donc emettre une fluorescence

[sansplomb]

Bonjour,

Oui il peut se fixer, mais de façon bien moins importante que vos anticorps de phénotypage. Cette fixation est dépendante du type cellulaire.
D'ailleurs l'utilité de ces Ac irrelevant est discutable.

cordialement

[Guillaume69]

Merci.
Mais je n'arrive pas a expliquer que l'irrelevant constitue un controle négatif puisqu'il se fixe tout de meme à la cellule et va donc emettre une fluorescence

Supposons qu'on veuille cibler une sous population de cellule exprimant le marqueur X.
L'anticorps spécifique de X fixe toutes les cellules exprimant le marqueur. Mais, par son fragment constant, il fixe aussi des protéines de manière non spécifique, et peut donc marquer des cellules qui n'expriment pas X.

Le but, c'est de soustraire cette fluorescence non spécifique.
Pour cela, on prend un anticorps irrelevant, non spécifique de X, se fixe donc uniquement de manière non spécifique, à l'aide de sa partie constante.

En comparant les deux signaux émis, on cible bien la population qui a été fixée uniquement de manière spécifique par l'anticorps anti X.