Cytométrie en flux

[invite54c908a4]

Bonjour tout le monde, petite question technique...je voudrais regarder la différence d'expression d'une protéine par cytométrie en flux dans 2 populations différentes une de lymphocytes T sains et l'autre de lymphome, comment je peux faire pour marquer les populations sachant qu'il n'y a pas a ma connaissance de marqueur spécifique sur les lymphocytes tumoraux? est ce que je peux marquer une population AVANT avec un anticorps fluorescent par exemple anti CD4 ou CD8, mais apres quand les é populations vont être mélangées est ce que l'anticorps va "tenir" et va pas se décrocher pour aller sur les autres qui expriment aussi le CD4ou8????? merci de m'aider

La référence à l'urgence est absolument inutile, je l'ai retirée.

pour la modération,
piwi
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[piwi]

Moi aussi j'ai une question:
Si j'ai bien compris vous faites un stage ou en tout cas un travail dans un laboratoire.
Ma question est: n'y a-t-il aucun projet de prévu? Vous semblez naviger à vue. N'y a-t-il personne pour vous encadrer et vous conseiller? Les questions que vous posez sont des questions qui devraient se traiter dans votre laboratoire.

Cordialement,
piwi

[invite54c908a4]

en fait je prépare un concours avec un sujet de thèse fictif ou je dois élaborer un projet fictif et je n'ai pas de labo pour m'aider pour l'instant alors je pensais venir sur ce forum pour obtenir un peu d'aide car je me sens un peu seule et pour moi pour progresser j'ai besoin de discuter et d'intéragir sur les idées, les protocoles, etc... si je viens ici c'est pour avoir des réponses que je ne peux obtenir ailleurs maintenant si ç adérange quelqu'un ok je ne viendrais plus poser mes questions ici et je garderais mes questionnements pour moi
PS: désolé pour le URGENT

[piwi]

Mais non ca ne dérrange pas. Juste que l'on avait l'impression que tu adaptais un projet tout seul dans ton coin. Mais ton explication permet de comprendre le pourquoi de cette impression.

Cordialement,
piwi

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite9eab997a]

Bonjour,
si tu fixes tes cellules apres marquage l'anticorps ne devrait pas se decrocher.
Par contre, si tu veux les remettre en culture ensuite tu ne peux pas fixer. Ceci dit, je pense (sans etre sure) qu'il y a peu de risques qu'il changed'epitope. Ca peut arriver mais ca sera tres minoritaire par rapport à ta population marquée d'origine.
Tu peux peut etre ausi envisager un marquage intracellulaire genre CFSE.
Bon courage,

[invite54c908a4]

super cette explication me va, je vais les fixer enfin fictivement... mon concours est cette après midi donc je ne vous embeterais plus avec toutes mes questions tordues...jusqu'au prochain concours...lol ! et merci encore pour votre aide

[invite9eab997a]

Bonne chance!