Electrophorèse capillaire

[invited40409d0]

Bonsoir,

J'ai extrait l'ADN de plusieurs plantes et effectué une PCR RAPD sur ces ADN. Ensuite j'ai réalisé une électrophorèse capillaire. Arrivé à cette étape, je ne comprends pas comment les molécules d'ADN sont séparées vu qu'elles sont toutes chargées négativement .
Le pH du tampon utlisé est de 8 donc d'après ce que j'ai lu le flux électro-osmotique est maximal et entraîne tout vers la cathode. Je pensais avoir une séparation en fonction du temps mais l'électrophorégramme que j'obiens m'indique l'intensité des pics en fonction des paires de bases.
Pouvez-vous m'éclairer sur le principe de cette électrophorèse ?

Merci d'avance
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[invite2274c1e2]

Tes molécules sont séparés en fonction de leur aille (en pb dans le cas des acides nucléiques)...
En fait, selon si elles sont plus ou moins grande, elles sont plus ou moins freinées par le maillage de ton gel d'électrophorèse, du coup elles ne vont pas a la même vitesse vers la cathode et elles se séparent.

[Edelweiss68]

Bonjour,

Euh attention mais il n'y a pas de "maillage" en électrophorèse capillaire...

Voir ici vers la fin de la page : http://www.snv.jussieu.fr/bmedia/laf...horese/E2.html

[invite2274c1e2]

Désolé

[A voir en vidéo sur Futura]

[invited40409d0]

Du coup cela migre selon la taille ou pas ?

[Edelweiss68]

Les composés migrent selon leur rapport charge/masse.