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Est ce que NADPH absorbe à 405nm?



  1. #1
    toucan-toco

    Est ce que NADPH absorbe à 405nm?

    Bonjour,
    J'ai réalisé l'autre jour un dosage du Glutathion total par une methode en kit (dont j'ai malheureusement oublié le nom).
    Les résultats se lisaient par Absorbance à 405nm ou 415nm.

    Chaque tube contenait :
    20µL de NADPH
    20µL de l'enzyme Glutathion reductase
    120µL de Tampon de réaction
    ainsi que mes echantillons.

    Je voudrais savoir si l'Absorbance est due à la formation de NADP+ suivant la réaction :
    Glutathion + NADPH,H+ ---> Glutathion reduit + NADP+ catalysé par la Glutathion réductase.

    Je sais que NADH absorbe à 340nm, je voudrais savoir si il en est de même pour NADPH (ou peut être NAD+) à 405nm car sinon je ne vois pas se qui pourrait absorber.

    Merci.

    -----


  2. #2
    toucan-toco

    Re : Est ce que NADPH absorbe à 405nm?

    En fait, après l'ajout de ces solutions et des echantillons, nous avions ajouté un Substrat puis incubé 10min. L'Absorbance provient surement d'une réaction entre le Substrat et le GSH (présent dans les xtrait cellulaire et grâce à la transformation du GSSG en GSH par la glutathion Reductase) !

    Donc voila, merci tout de même et si vous pensez que je me trompe merci de me le signaler !

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