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Rôle de l'EDTA dans dans l'isolement de l'ADN



  1. #1
    apouchoute

    Rôle de l'EDTA dans dans l'isolement de l'ADN


    ------

    Bonjour à tous,
    Je dois faire l'isolement de l'ADN de thymus de veau. Dans la solution A utilisée pour homogénéiser le thymus dans un waring blendor, il y a une certaine quantité de EDTA. Quelqu'un pourrait-il me dire à quoi sert le EDTA dans cette solution? Et pourquoi le thymus de veau et non de porc (moins cher à mon avis) par exemple?
    Merci pour votre collaboration

    -----

  2. #2
    siliamnerack

    Re : Rôle de l'EDTA dans dans l'isolement de l'ADN

    De l'EDTA dans une solution de solubilisation cellulaire va permettre, en chélatant les cations bivalents (Mg2+ ; Ca2+), de rompre les jonctions entre les cellules à dissocier d'un tissus (ici les tissus du thymus). En éffet, Les protéines permettant la jonction cellulaire (ex: cadhérines) fonctionnent en présente de ces cations. Le faite de les chélater (les cations) entraîne donc une inefficience des protéines de jonctions, et donc une séparation des cellules d'un tissus.

  3. #3
    siliamnerack

    Re : Rôle de l'EDTA dans dans l'isolement de l'ADN

    Info supplémentaire: en biologie moléculaire, on utilise l'EDTA pour chélater ces mêmes cations lors d'une extraction d'ADN afin de protéger l'ADN des DNAses qui elles aussi sont activent uniquement en présence de cations bivalents.

  4. #4
    Topoisomerase

    Re : Rôle de l'EDTA dans dans l'isolement de l'ADN

    d'accord avec siliamnerack, en effet l'EDTA va plutôt servir d'inibiteur de DNAse qui sont Mg2+ dependante, la lyse cellulaire ici sera faite mecaniquement avec le broyeur.

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