proteines

[invite9fcc85a8]

Bonsoir tous le monde
J'aimerai qu'on m'éclaire sur la méthode à utiliser pour répondre aux sujets de types qcm ( questions choix multiples) sur les proteines suivant :


"On purifie une protéine que l'on analyse en éléctrophorèse PAGE;
Sans traitement au B-mercaptoéthanol on obtien une seule bande de 120 kDa et après traitement par le B-merpcaptoéthanol on obtien une seule bande de 60 kDa. Sachant que la protéine native a une maisse moleculaire totale de 240 kDa",
indiquez parmi la propositions suivantes concernant la composition en sous unités, celle(s) qui est (sont) exacte(s) :

a) Deux sous-unités de 120kDa associées par des ponts disulfures
b) Deux sous-unités de 60kDa associées par des ponts disulfures et une de 120kDa non associée par des ponts disulfure
c) Quatre sous unités de 60 kDa
d) Une sous-unité de 120 kDa associée par des ponts disulfure à une sous-unitésde 60 kDa
e) Trois sous-unités une de 120 kDa et deux de 60kDa

Merci
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[invite00c662f2]

bonsoir,
voilà, c'est la réponse c qui est juste, le B mercaptoethanol (ou dithiotrétol ou iodoacétamide) sont des agent réducteurs, empêchent l'oxydation des cystéines dans les protéines, donc rompent les ponts disulfures, avant d'utilisé cet agent, on a eu une bande de 120kda (deux bandes superposé de 120kda) parce que le PM de notre protéine est le double (240), puis juste après l'utilisation de notre agent réducteur, on a eu une bande de 60 Kda(donc 4 bande superposé de 60 kda) donc les 4 sous-unités sont liées par des ponts disulfure.

dis moi stp, avant de passer à la PAGE, ils ont cité l'utilisation de l'urée ou formamide, ou même c'est une SDS-PAGE? ou c'est juste une PAGE?