Bonjour,
Jespere que quelqu'un pourra m'aider:
J'ai des partiels la semaine prochaine donc je m'entraine sur des examens des années précédentes, mais je n'ai pas de correction donc ce serait pour avoir confirmation sur les reponses que je donne et quelques questions
Les phospholipases sont des enzymes hydrolysant les liaisons ester des phospholipides. Comme il existe quatre
liaisons ester dans un phospholipide, on distingue donc plusieurs enzymes selon leur site d’action. La
phospholipase C (PLC) est l'une d'entre elles.
Il existe notamment une PLC capable d'hydrolyser les phosphatidylsérines en diacylglycérols et phosphosérine.
1/ Sachant que le diacylglycérol libéré est le 1-palmitoyl, 2-oleyl glycérol, donnez la structure semi-développée
plane des deux acides gras de ce diacylglycérol.
- Je pense qu'il s'agit de l'acide palmitique et de l'acide oléique.
2/ Ecrire la formule semi développée plane du diacylglycérophospholipide suivant : 1-palmitoyl, 2-oleylphosphatidylsérine
en tenant compte de son état de protonation majoritaire à pH 7,0.
Pour moi ça serait ça:
CH2 - O - C=O
l................\_ (CH2)14 - CH3
CH - O - C=O
l..............\_ (CH2)7 - CH=CH - (CH2)7 - CH3
CH2 - O - P=O
................l \_ O - CH2 - CH - NH3 +
...............O-....................l
.............................. .......COO-
(Désolé pour les poitillés j'ai pas pu faire autrement)
3/ indiquez sur la structure de la phosphatidylsérine quelle liaison est clivée par la PLC.
- Pour moi ce entre le O et le P ( celui qui est lié au 1er CH2)
C'est quoi d'ailleurs ce P ??
Une étude structurale de la PLC montre que trois résidus d’acide aminé du site actif de cet enzyme sont essentiels à
la reconnaissance de la partie phosphosérine de la phosphatidylsérine par l’intermédiaire d’interactions non
covalentes. Il s’agit des résidus suivants Lys44, Lys69 et Glu180
4/ Ecrivez la structure semi-développée plane de ces trois acides aminés à pH 7,0.
(pKαCOOH=2,1, pKαNH3+=9,8 et pKR-Glu=4,3, pKR-Lys=10,5)
- Ici je ne vois pas ou est la difference entre la Lys44 et le Lys69, si vous pouvez m'expliquer...
Mais sinon j'ai trouvé que pour le Glu, on a COO- en fin de chaine et pour la Lys NH3+
5/ Quels sont les groupements des phosphatidylsérines pouvant interagir avec les chaînes latérales des acides
aminés du site actif de la PLC à pH 7,0 ? Quel est le type d’interactions non covalentes mis en jeu ?
- Je pense que ce sont de sliaisons phosphoesther mais j'arrive pas trop a repondre a la question, quels groupements??
Et si vous pouvez m'apporper plus de precision par exemple avec l'electrophorese sur gel de poly acrylamide:
Quand on a les differentes pistes, et les taches qui sont marquées en fonction de peur poids, c'est la + grosse (par exemple 200kD) ou la plus petite (par exemple 20kDA) qui fera un grand pic? par rapport a la DO a 280nm
J'en demande bcp, si vous pouvez m'aider au maximum ce serait très sympa
Merci
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