bonjour tous le monde !jai un compte rendu que je nai pas pu resoudre sa deuxieme partie de la cinetique enzymatique!voila le contenu
ETUDE DE LA POLYPHENOL OXYDASE DE LA POMME
2. Cinétique
2.1. Réactifs et matériel
- extrait enzymatique,
- S = solution de catéchol 3.10-2 mol/L en tampon acétate 0,05 mol/L ; pH 5,6,
- T = tampon acétate 0,05 mol/L ; pH 5,6,
- Si = solution de catéchol 3.10-2 mol/L en tampon acétate 0,05 mol/L ; pH 5,6 + acide benzoïque 2.10-3 mol/L,
- Ti = tampon acétate 0,05 mol/L ; pH 5,6 + acide benzoïque 2.10-3 mol/L,
- spectrophotomètre avec cuve thermostatée.
2.2. Préparation des solutions de substrat
sans inhibiteur
S1 S2 S3 S4 S5 S6
S (mL) 20 20 15 10 7,5 5
T (mL) 0 10 15 20 22,5 25
avec inhibiteur
Si1 Si2 Si3 Si4 Si5 Si6
Si (mL) 20 20 15 10 7,5 5
Ti (mL) 0 10 15 20 22,5 25
2.3. Mesures
Les mesures sont réalisées à 30°C sur un mélange de 3 mL de substrat et 100 µL d'extrait. Les absorbances sont lues à 400 nm.
2.4. Détermination des caractéristiques cinétiques
apartir de la courbe de l'absorbance en fonction des concentration en substrat s:une courbe sans inhibiteur et lautre avec inhibiteur
Déterminer les vitesses initiales.
Calculer KM, VM et Ki.
Quel est l'effet de l'acide benzoïque ?
j'attends votre reponse impatiemment!
merci d'avance
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