Dosage du NO ?

[invite00c662f2]

Bonjour tous le monde
Voilà, en révisant mon cours des technique d'analyse immunologique, je m'étais posé une question, et qui reste toujours sans réponse?!
Alors voilà, Comment peut on doser les NO ? je sais bien que c'est pas réalisable par ELISA ou ELISPOT ou encore le western blot, j'ai eu l'idée de l'enzyme!! la NOS, genre qu'on mesure son activité!! mais avec quelle technique?! Comment?!
Merci
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[Edelweiss68]

Bonjour,

Des kits ELISA existent et utilisent la réaction de Griess, mais pas en routine (à confirmer). La technique la plus utilisée est, je pense, électrochimique^*, sinon la spectrométrie IR doit pouvoir marcher.

* PRINCIPE : "Le DAF-2/DA est un dérivé du 4,5-diaminofluorescéine (DAF-2) qui permet de doser les taux intracellulaires de NO. Ce composé est perméable aux membranes plasmiques cellulaires. Une fois à l’intérieur de la cellule, il est hydrolysé par les estérases cellulaires ce qui libère le DAF-2. Ce dernier, en présence d’oxygène, réagit rapidement avec le NO et non avec les formes oxydées du NO, telles que le NO₂^- et le NO₃^-, ou les espèces réactives de l’oxygène, telles que l’O₂^-, le H₂O₂, et l’ONO₂^-. La réaction du DAF-2, non fluorescent, avec le NO donne un composé fluorescent, le triazolofluorescéine (DAF-2T). Celui-ci émet une fluorescence à 515 nm après excitation à 495 nm."

Source : http://tel.archives-ouvertes.fr/docs...seLePennec.pdf