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Préparation suspension à 10^6 bactéries/mL



  1. #1
    Grananas

    Préparation suspension à 10^6 bactéries/mL


    ------

    Bonjour, bonjour !

    J'aimerai préparer une suspension bactérienne à une concentration d'environ 10^6 ou 7 bactéries/mL, à partir d'une culture solide sur boîte de pétri. Pour cela, je n'aurai pas de solution de McFarland à disposition, ni de bouillon nutritif. Est-ce possible de le faire dans de l'eau physiologique à partir d'une suspension dense ?

    Et pourriez-vous également m'indiquer à combien de bactéries/mL est estimée une suspension dense ?

    Merci.

    -----

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  3. #2
    Alixouninette

    Re : Préparation suspension à 10^6 bactéries/mL

    pour le milieu de culture, je sais pas trop.
    On m'a appris qu'une colonie = 10^6 bactéries environs. Donc je serais toi, je prélèverai une colonie que je resuspendrai dans le milieu liquide.

    Apres je n'ai que des rudiments de microbio, quelqu'un d'autre pourra surement mieux répondre que moi...
    Hâte toi de bien vivre et pense que chaque jour est a lui seul une vie (Sénèque)

  4. #3
    Aqualung

    Re : Préparation suspension à 10^6 bactéries/mL

    Pour ce faire il vous faudra une cellule de comptage afin d'estimer la concentration bactérienne. Ces cellules vous permettent d'estimer (et c'est bien une estimation) la concentration bactérienne après comptage du nombre de cellules sur une surface donnée. Je ne connais que cette méthode pour être un minimum précis. Après une solution est dense à 10^8 ou 10^9 bactéries, du moins pour des bactéries lactiques.

    La suspension peut se faire dans de l'eau peptone, je ne connais pas la composition de l'eau physiologique, mais si elle contient des sels, et du Tween (pour éviter les agrégats) cela devrait suffire.

  5. #4
    Flyingbike

    Re : Préparation suspension à 10^6 bactéries/mL

    Citation Envoyé par Aqualung Voir le message
    composition de l'eau physiologique
    150mM NaCl

    .

  6. #5
    Aqualung

    Re : Préparation suspension à 10^6 bactéries/mL

    L'eau peptonnée est un peu plus riche :

    Composition (g) pouvant être modifiée pour 1 litre de milieu :
    Peptone : 10,0.
    Sodium chlorure : 5,0
    Tween 80 1%

  7. A voir en vidéo sur Futura

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