Dilution 2 en 2 ?

[invite9f4a98fa]

Bonjour,

je suis en train de faire un Elisa et j'ai besoin d'aide pour réaliser ma gamme étalon qui est répartie sur 8 puits.

Voici ce à quoi doit ressembler ma gamme :

Puit 1 : Solution mère pure X à 12.2ng/ml (flacon) - 100µl
Puit 2 : Solution X à 10.5ng/ml
Puit 3 : Solution X à 8.5ng/ml
Puit 4 : Solution X à 6.5ng/ml
Puit 5 : Solution X à 4.5ng/ml
Puit 6 : Solution X à 2.5ng/ml
Puit 7 : Solution X à 0.5ng/ml
Puit 8 : Diluant (H2O 100µL)

Le diluant est de l'eau.
Le Volume Final dans chaque puit doit être de 100µL.

Comment procéderiez-vous pour réaliser cette gamme ?

Amitiés.
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[invite9f4a98fa]

Puit 1 : Solution mère pure X à 12.2ng/ml (flacon) - 100µl

La Solution mère pure X est à 12.5ng/ml et pas à 12.2ng/ml comme je l'ai écrit.

[Edelweiss68]

Les valeurs des différentes solutions sont-elles ajustables afin d'éviter les étapes supplémentaires ?

[Flyingbike]

Comme Edelweiss, parce qu'a mon avis sur une gamme comme celle la faire une dilution en cascade est casse gueule. Sinon faut faire les points un par un et compléter a 100 a chaque fois.

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite853321bf]

Je créerai une feuille de calcul qui à partir du volume final désiré, des concentrations initiales et finales me sortiraient les volumes de solution à prélever et à compléter en faisant un bête produit en croix.

[invite9f4a98fa]

Comme Edelweiss, parce qu'a mon avis sur une gamme comme celle la faire une dilution en cascade est casse gueule. Sinon faut faire les points un par un et compléter a 100 a chaque fois.

Les points un par un et qsp 100, c'est ce que je pensais faire dans un premier temps. Mais je pense plutôt modifier légèrement la gamme pour qu'elle soit adaptée à une dilution en cascade

ça donnerait ;
[12.5][6.25][3.125][1.5625][0.78125][0.390625][0.1953125][0]

Merci pour votre aide.

Bon week-end.

[TanguyE]

Je pense que faire une cascade reste la meilleure solution pour que ta gamme soit bien linéaire. Pour mémoire quand je faisais des gammes "qsp" mon R² était de 0.97-0.98 alors que des gammes en cascades m'ont toujours donné des 0.999.

[invitec718404f]

Oui pour une gamme il faut faire une cascade, tes volumes finaux ne seront pas les même entre tes tubes (dernier) mais c'est pas grave si tu n'as pas besoin de tous le volume et résonne en concentrations pas en volumes.