Bonjour,
Je suis face à un dilemme:
je cherche une technique qui me permettrai de savoir, de manière globale, quel est l'état de méthylation des lysines des histones. Il existe des Ac spécifiques de chaque lysines, mais c'est trop couteux, si j'achète chaque type d'Ac, alors, comment faire???????????
Merci
Salut,
si les quantités sont suffisantes j'opterai pour une simplification au maximum de tes échantillons (séparation des protéines nucléaires des cytoplasmiques) puis je ferai un gel d'électrophorèse 2D (la méthylation des lysines doit modifier le pi de la protéine et donc conduire à plusieurs spots), et si donc les quantités sont suffisantes une caractérisation par spectrométrie de masse ms-ms (après découpe du gel, digestion puis extraction des fragments peptidiques du gel, attention à la capacité de la trypsine de réussir à couper ou pas après une lysine méthylée !!)
Voila,
Dernière modification par Edelweiss68 ; 13/06/2011 à 21h14. Motif: Correction
Merci bcp bubux!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
