centrifugation en gradient zonal

[inviteab02dd1d]

Bonjour !
Petite question sur la centrifugation en gradient zonal... Je ne comprends pas ici quelle est l'utilité du gradient, par exemple du sucrose, alors que la séparation ne se fait pas en fonction de la densité (comme pour la centrifugation en gradient isopycnique, où les composants migrent dans le gradient vers la position qui correspond à leur densité) mais en fonction de la taille (rayon de Stokes).
Enfin, je voudrais savoir si, lors de la centrifugation différentielle, avec des centrifugations de vitesse et durée croissante, on utilise un gradient zonal (puisque les composants semblent bien migrer en fonction de leur taille et qu'on retrouve les composants les plus lourds dans le culot) ?
Merci beaucoup de votre réponse ! Et bonne soirée..
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[invite02cefc91]

Bonjour,

Element de réponse :

Moi j'utilise le gradient de sucrose pour séparer les ribosomes en fonction de leur poids.
Grâce à un gradient de 15-60%, je sépare aisément le surnageant, du ribosome 40 S, du 60, du 80S, et des polysomes (correspondant à un amas de ribosomes). Je peux ainsi étudier chacune de ses fractions séparément.
Bien évidemment, il faut adapter la vitesse et la durée de la centrifugation puisqu'au bout d'un certain temps et à une certaine vitesse, on "culote" trop de composés.

Je ne sais pas si ça t'aide.

[inviteab02dd1d]

Merci pour votre réponse ! (et pardon pour mon retour tardif).