Bonjour,
je ne comprends pas vraiment le principe du marquage au BrdU de l'ADN ; je sais que ce marqueur remplace la thymine pendant la synthèse de l'ADN. du coup peut on le considérer comme un uracile ?
et est-ce qu'il ne marque que les cellules pendant leur phase de réplication de l'ADN ou il reste encore après ?
merci de m'aider à y voir plus claire
Bonjour,
Le BrdU est bien un analogue de la thymidine, c'est à dire qu'il est formé d'une base pyrimidique et d'un sucre, mais ce n'est ni une thymidine, ni un uracile.
Il est utilisé pour détecter les cellules dont la réplication de l'ADN est active puisqu'il vient s'incorporer en lieu et place de la thymidine lors de cette phase. Comme c'est un analogue de la thymidine, il n'est pas considéré comme aberrant par les mécanismes de réparation de l'ADN donc il reste incorporé dans l'ADN après réplication.
donc quand on le détecte sur des cellules, ca veut simplement dire qu'elles ont subi une division ?
Tout à fait
Merci
Bonne journée !
pas tout a fait, ça peut être des cellules en phase S avant mitoseEnvoyé par Eva38
BrdU signifie Bromo desoxy Uridine. Je pense que l'on peut conclure quant à sa proximité avec l'uridine (uracile)
Par ailleurs l'intérêt est de faire du suivi du devenir des cellules dans le temps. La BrdU est incorporée dans l'ADN et y reste. Vous pouvez donc suivre la différenciation des cellules et leur migration.
piwi
Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.
Je ne pense pas que ça soit utilisé de cette façon pour deux raisons : c'est un mutagène, cytotoxique, donc les cellules incorporant du BrdU sont mal barrées. En plus en raison du caractère ssemi conservatif de la réplication, assez rapidement on ne voit plus rien.BrdU signifie Bromo desoxy Uridine. Je pense que l'on peut conclure quant à sa proximité avec l'uridine (uracile)
Par ailleurs l'intérêt est de faire du suivi du devenir des cellules dans le temps. La BrdU est incorporée dans l'ADN et y reste. Vous pouvez donc suivre la différenciation des cellules et leur migration.
piwi
Le BrdU est surtout utilisé en pulse, c'est a dire injecté ou ajouté quelques minutes/heures avant l'observation.
Mais si pourtant. On l'utilise bien comme cela.
piwi
Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.
ok, tu as un exemple ? (par curiosité)
@Flyingbike
Ca a utilisé pour la neurogénèse du cortex et la migration radiaire des neurones excitateurs.
En gros, ils sont tous originaires du même endroit (près du ventricule) et migrent plus ou moins loin pour former les différentes couches du cortex.
Les premiers neurones générés (à l'exception des tous premiers, transitoires) forment les couches les plus profondes, les derniers les couches plus superficielles.
Ca a été montré en faisant des brefs pulses de BrdU à différents temps, et en regardant plus tard par immuno quelles couches du cortex étaient marquées.
Une sorte d'ancêtre du Cre-lox
Et puis maintenant il y a les souris FUCCI
http://www.brc.riken.jp/lab/animal/m...200903_01.html
Il y a ce papier aussi: http://jcs.biologists.org/content/12....full.pdf+html
Ça parle de spermatogenèse.
piwi
Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.
ouah, cool !
Pour le reste : je voulais dire qu'on n'utilise pas le BrdU pour faire par exemple du lignage cellulaire. Ca reste utilisé en pulse et a court ou moyen terme.
Merci pour les infos
